Tincion Gram

TINCION GRAM
La tinción gran o coloración Gam es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas.Debe su nombre al bacteriólogo Christian Gram, que desarrollo la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar unaaproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color violeta y bacteria Gram negativa a las que sevisualizan de color rosa.
Reactivos: La tinción Gram utiliza en orden estricto de 1 a 4 los siguientes reactivos.
1- CRISTAL VIOLETA o violeta de genciana: Colorante básico.
2- LUGOL DEGRAM: Mordiente.
3- ALCOHOL – ACETONA: Decolorante.
4- FUSCINA (SAFRANINA): Colorante de contraste.
Fundamento: el cristal violeta sirve como colorante básico uniéndose a lapared celular bacteriana, con la ayuda del mordiente que refuerza la unión del colorante. Las bacterias GRAM POSITIVAS debido a la estructura y composición bioquímica de su paredcelular retiene el complejo cristal violeta – lugol y aun después del tratamiento con el decolorante conserva el colorante básico, por lo que se observa al microscopio de color azuloscuro o violeta una vez concluida la técnica de tinción.
Las bacterias GRAM NEGATIVAS pierden el colorante básico cuando son tratadas con el decolorante debido a que el alcoholdisuelve el contenido lipidico de la pared celular lo que aumenta la permeabilidad celular, dando como resultado la pérdida del complejo cristal violeta- lugol. Las bacterias decoloradascaptan entonces el colorante de contraste, razón por la cual estas células bacterianas se observan al microscopio de color rosado una vez concluida la técnica de tinción.