tincion gram
Páginas: 3 (527 palabras)
Publicado: 10 de septiembre de 2013
Tema: Tinción Gram
Objetivos
Realizar correctamente la coloración
Clasificar algunas especies bacterianas en Gram positivas o Gram negativas de acuerdo a esta tinción.
Marco Teórico
Seutiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a lasbacterias que se visualizan de color morado y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella, el cristal violeta penetra en todas las células bacterianas a través de la paredbacteriana. El lugol actúa de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve pararealizar la decoloración, los organismos Gram (+) no se decoloran, mientras que los Gram (-) sí lo hacen. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste.Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen azules.Procedimiento
1. Esterilizar el asa hasta el rojo vivo, tomar una pequeña muestra de la cepa (E. Coli) y colocar en el portaobjetos dentro del límite del área dibujada, posteriormente esterilizar el asanuevamente.
2. Fijar la muestra pasando por el mechero 3 veces, cuidando de no quemar la muestra.
3. Cubrir totalmente el frotis con cristal violeta durante 1 minuto, escurrir y enjuagar.
4. Cubrirtotalmente el frotis con lugol durante 1 minuto, escurrir y enjuagar.
5. Cubrir el frotis con alcohol cetona durante 10 seg, escurrir y enjuagar.
6. Cubrir totalmente el frotis con safraninadurante 1 min, escurrir y enjuagar.
7. Dejar secar la muestra.
8. Observar en el microscopio.
Resultados
Se pudo observar la diferencia entre bacterias gram (+) y gram (-) debido a la coloración...
Objetivos
Realizar correctamente la coloración
Clasificar algunas especies bacterianas en Gram positivas o Gram negativas de acuerdo a esta tinción.
Marco Teórico
Seutiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a lasbacterias que se visualizan de color morado y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella, el cristal violeta penetra en todas las células bacterianas a través de la paredbacteriana. El lugol actúa de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve pararealizar la decoloración, los organismos Gram (+) no se decoloran, mientras que los Gram (-) sí lo hacen. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste.Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen azules.Procedimiento
1. Esterilizar el asa hasta el rojo vivo, tomar una pequeña muestra de la cepa (E. Coli) y colocar en el portaobjetos dentro del límite del área dibujada, posteriormente esterilizar el asanuevamente.
2. Fijar la muestra pasando por el mechero 3 veces, cuidando de no quemar la muestra.
3. Cubrir totalmente el frotis con cristal violeta durante 1 minuto, escurrir y enjuagar.
4. Cubrirtotalmente el frotis con lugol durante 1 minuto, escurrir y enjuagar.
5. Cubrir el frotis con alcohol cetona durante 10 seg, escurrir y enjuagar.
6. Cubrir totalmente el frotis con safraninadurante 1 min, escurrir y enjuagar.
7. Dejar secar la muestra.
8. Observar en el microscopio.
Resultados
Se pudo observar la diferencia entre bacterias gram (+) y gram (-) debido a la coloración...
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