Tincion Gram

PRÁCTICA N°3
Tinción diferencial Gram y Tinción dife rencial ácido resistente.
Objetivo
- Demostrar a través de la técnica de tinción diferencial de Gram la existencia de dos grupos principales debacterias.
- Distinguir a través de dos técnicas de tinción diferencial la presencia de endosporas bacterianas y diferenciarlas de las estructuras vegetativas normales.
Fundamento:
Tincióndiferencial GramLos microorganismos no sólo difieren químicamente de su entorno, sino también muestran diferencias físicas y químicas entre ellos. Esto da lugar a que puedan reaccionar diferencialmenteante un procedimiento de tinción. La tinción diferencial por lo tanto, nos permite distinguir entre grupos de microorganismos .En particular, la tinción de Gram, es la más utilizada de las técnicas detinción diferencial para distinguir entre dos grupos de bacterias: Gram positivas y Gram negativas.La diferencia entre estos dos tipos de células radica en la variación de capas que conforman susparedes. La pared de la gram- positivas es principalmente una gruesa capa de peptidoglucano , mientras que las gram- negativas la pared es una multicapa formada por una capa de peptidoglucano rodeada poruna capa externa de proteína y lipopolisacárido. La diferente permeabilidad de estas estructuras de superficie ante los reactivos utilizados en las tinción Gram, permite la diferenciación en lacoloración final.La tinción de Gram requiere de cuatro soluciones :Un colorante básico, Un mordiente, un agente decolorante y un contraste (otro colora nte básico).Las propiedades de los colorantes básicosya fueron discutidas previamente. Un mordiente es una sustancia que incrementa la afinidad entre la célula y el colorante, es decir ayuda a la fijación del colorante en la estructura de interés.Ejemplos de mordientes son ácidos, bases, sales metálicas, y yodo. Bajo la acción de un mordiente una célula se tiñe más intensamente y es más difícil decolorarla. Un agente decolorante es una...