tincion negativa

Tinción negativa
Objetivo: que el alumno observe la diferencia de una tinción de GRAM entre una tinción negativa y distinga los microorganismos en esta.
Marco conceptual: Tinción negativa es unatécnica de microscopía que permite contrastar las muestras mediante una sustancia opaca a los fotones (microscopía óptica) o a los electrones (microscopía electrónica). En el primer caso, se empleanigrosina o tinta china; para el caso de bacterias que especulan, esta técnica permite visualizar las esporas como entes refringentes sobre un campo de fondo oscuro. En caso de microscopía electrónica detransmisión, se emplean sustancias de alto número atómico que, por tanto, resultan opacas a los electrones transmitidos. Típicamente, estas sustancias son acetato de uranilo, citrato de plomo omolibdato de amonio. Al electrónico, esta técnica permite visualizar virus, flagelos, bacterias y otros entes de escaso tamaño.
Con la tinción negativa, conoceremos la morfología de los microorganismos,realizando una coloración de fondo, sin que se coloreen las bacterias o las estructuras que se tratan de observar.
Este procedimiento se aplica para observar la forma de todos los microorganismospresentes en una muestra
La pared celular de las bacterias tiene una ligera carga negativa, por eso utilizamos colorantes básicos que se adhieran a su pared y así poder observarlos, pero en el caso de latinción negativa, utilizamos un colorante ácido (Tinta china o Nigrosina), de forma que las bacterias repelen el colorante en vez de absorberlo, y por tanto veremos todo el campo teñido y veremos lasbacterias como zonas brillantes en las cuales no penetró el colorante.
El tamaño de la mayoría de las células bacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el microscopio óptico. La principaldificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorantes. Estos pueden emplearse para distinguir...