tincion
El sistema de tinción Sudan Black B de Sigma-Aldrich se utiliza en la demostración istoquímica de gránulos neutrófilos en frotis de sangre o médula ósea. El sistema de tinciónSudan Black B es para uso diagnóstico in vitro.
Varios lípidos, incluyendo los fosfolípidos, las grasas neutras y los esteroles, se tiñen intensamente con Sudan Black B. La reacción de los gránulosneutrófilos con el tinte fue descrita por Sheehan y Storey en 19471. Generalmente, el patrón de tinción leucocitaria de Sudan Black B es parecido al de la mieloperoxidasa2. Las células que seencuentran a lo largo de las vías linfáticas muestran una tinción negativa, mientras que las formas mieloides y monocitoides muestran las reacciones positivas características. Por lo tanto,
Sudan Black Bestá considerado como un auxiliar útil en la identificación de las leucemias mielocíticas y mielomonocíticas2.
Los métodos antiguos utilizaban una fijación de vapor de formaldehído en los frotis desangre2, técnica que puede dar como resultado una pérdida celular y artefactos de tinción.
El procedimiento de Sigma-Aldrich utiliza un fijador de glutaraldehído tamponado y un tiempo deincubación más corto, lo que da como resultado una excelente tinción sin pérdida celular ni distorsión3.
REACTIVOS
REACTIVO DE TINCIÓN SUDAN BLACK B,
Sudan Black B, 0,18 % (p/v), en 69 % de etanol ycon fenol tamponado con fosfato.
SOLUCIÓN DE HEMATOXILINA, GILL Nº 3, número de catálogo GHS-3
Hematoxilina certificada, 6 g/l, yodato sódico, 0,6 g/l, sulfato de aluminio, 52,8 g/l, yestabilizante.
SOLUCIÓN DE GLUTARALDEHÍDO,
Glutaraldehído, 4 % en tampón borato, pH 7,6.
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD:
Almacenar el reactivo de tinción Sudan Black B a temperatura ambiente (18–26°C).
La etiqueta del reactivo indica la fecha de caducidad.
Almacenar la solución de hematoxilina, Gill Nº 3 a temperatura ambiente (18–26 °C), protegida de la luz. La etiqueta del reactivo...
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