tincion


Aunque los microorganismos vivos se pueden observar directamente en fresco al microscopio óptico, la mayoría de las veces es necesario teñirlos para que por medio del uso de colorantes,1. Permiten hacer visibles a los objetos microscópicos y transparentes. 2. Revelan su forma y tamaño. 3. Muestran la presencia de estructuras internas y externas. 4. Producen reacciones químicas específicas.Las tinciones en microbiología son las primeras herramientas que se utilizan en el laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades infecciosas. Hay una gran variedad de tinciones, que se han ido desarrollando para la detección de los diferentes agentes infecciosos (bacterias, parásitos y hongos).
La tinción de Gram se considera básica en la valoración inicial de muestras para análisisbacteriológico, mientras que la tinción de Wright se ocupa para el diagnóstico de enfermedades muy particulares en el rubro de la parasitología. Técnicas tintoriales específicas de gran utilidad: la tinción de Ziehl-Neelsen, que se utiliza para el diagnóstico de enfermedades crónicas como la tuberculosis o la actinomicosis, o la tinción de azul de lactofenol, que preserva e identifica a los componentesestructurales de los hongos.

Las tinciones se pueden clasificar como simples cuando toda la muestra se tiñe del mismo color y se utiliza un sólo colorante (azul de lactofenol o tinta china); tinción diferencial, cuando se visualiza más de un color porque se utiliza más de un colorante (Gram o Ziehl-Neelsen); tinción específica, cuando se utilizan anticuerpos marcados con una molécula fluorescentepara identificar una estructura celular en particular.

En la valoración de las muestras, es trascendente el poder de resolución del microscopio (capacidad que posee un objetivo para distinguir la distancia mínima entre dos puntos del objeto para que se puedan visualizar como dos puntos separados). El máximo poder de resolución en un microscopio de luz emitida es de 0.2 μm, por lo que se requiere deuna amplificación entre 1000-1400x, mientras que el poder de resolución del ojo humano es de aproximadamente 0.2 mm.

Para hacer una tinción se necesita de un colorante (sustancia capaz de dar color a células, tejidos, fibras, etcétera). Se pueden divide en: colorantes naturales (extraídos de plantas o animales, y colorantes artificiales, (de minerales procesados y manipulados en ellaboratorio). Químicamente, está constituido de un componente cromóforo (la capacidad que tiene la molécula para que sus electrones absorban energía o luz visible, se exciten y emitan diversos colores de acuerdo con la longitud de emitida como resultado del cambio en el nivel energético) y un auxócromo (tienen la función de intensificar la formación de color mediante la acción de grupos de átomos nosaturados; su función es desplazar a los cromóforos hacia longitudes de ondas largas para aumentar la intensidad).


Tinción de Gram
es un procedimiento de gran utilidad empleado en los laboratorios donde se manejan pruebas microbiológicas. clasifica a las bacterias en dos grandes grupos: bacterias Gram negativas y bacterias Gram positivas. Los principios de la tinción de Gram están basados en lascaracterísticas de la pared celular de las bacterias, la cual le confiere propiedades determinantes a cada microorganismo. La pared celular de las bacterias Gram negativas está constituida por una capa fina de peptidoglicano y una membrana celular externa, mientras que las bacterias Gram positivas poseen una pared celular gruesa constituida por peptidoglicano, pero no cuentan con membrana celularexterna; La tinción de Gram se basa en colocar como colorante primario cristal violeta, el cual tiene afinidad con el peptidoglicano de la pared bacteriana. Posteriormente, se coloca lugol, el cual sirve como mordiente e impide la salida del cristal violeta por la formación de un complejo cristal violeta yodo que satura los espacios del peptidoglicano de la pared bacteriana. En seguida, se coloca una...