tinciones diferenciales

TINCIONES DIFERENCIALES Y SELECTIVAS

TINCIONES DIFERENCIALES
Nos permite diferenciar entre grupos de bacterias que tienen distintas propiedades tintoriales.
Las tinciones diferenciales máscomúnmente utilizadas son: tinción de Gram y tinción de ziehl-neelsen.
TINCION DE GRAM:
Fue desarrollada empíricamente por Christian Gram en 1884, a pesar de los años transcurridos, las tinciones se hanmodificado mínimamente.
La técnica es capaz de diferenciar 2 grandes grupos de eubacterias: Gram positivas y Gram negativas, estas se diferencian por su pared celular bacteriana.
Las Gram positivasse observaran azules por el cristal violeta y no perderán la coloración, Las Gram negativas perderán la coloración inicial y se teñirán de color rosa debido a la safranina.
La tinción de Gramnecesita de 4 colorantes:
COLORANTE 1: colorante base, el más común es cristal violeta.
SOLUCION MORDIENTE: fijas las tinciones y aumenta la afinidad entre el colorante y las células, el más común es unasolución diluida de yodo
AGENTE DECOLORANTE: disolvente orgánico, alcohol acetona.
COLORANTE DE CONTRASTE: colorante básico de diferente color que el primero, por ejemplo: safranina.
PROCEDIMIENTOTECNICO:
1. Realizar el extendido de la muestra
2. Fijar el extendido, ya sea un método físico o uno químico.
3. Primer colorante
4. Mordiente: lugol
5. Decoloración: alcohol-acetona
6. Segundocolorante: safranina


TINCION DE ZIEHL-NEELSEN
Fue desarrollada por Paul Ehrlich por la presencia de los bacilos causantes de tuberculosis en muestras clínicas de pacientes
La técnica capaz dediferenciar 2 grandes grupos de eubacterias: BAAR positivas y BAAR negativas.
Esta coloración necesita de calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Alsuspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante no puede salir de la bacteria. Las bacterias que resisten la decoloración...