Tinciones Hematologia

1) COLORACIÓN DE WRIGHT
La naturaleza ácida o básica de las estructuras celulares determina su avidez por los componentes del colorante policromático de Wright; es así como los ácidos nucleicos se tiñen con azul B que es el básico y la hemoglobina con la eosina Y que es ácida. Otras estructuras se tiñen por una combinación de ambos y se denominan neutrófilas.
Finalidad de la prueba: Latinción de las extensiones sanguíneas con colorantes policromáticos permite la identificación de los diversos tipos celulares en la sangre periférica y en la medula ósea.
Principio de la prueba: Los colorantes policrómaticos son mezclas de azul de metileno alterado por el calentamiento en solución de NaHCO3 ó en bicromato ácido (azur de metileno) y eosina. El azur de metileno es azul violeta y se tiñelos componentes celulares ácidos como el núcleo y el RNA citoplasmático. La eosina es roja y tiñe los componentes más básicos, como la hemoglobina. Algunas estructuras se tiñen con ambos componentes. Los colorantes son soluciones metanólicas del precipitado que se forma al mezclar los dos colorantes.Debido a que estas son disueltas en metanol, la solución puede ser empleada tanto para fijar lasextensiones de sangre o medula como para teñirlas.
Observaciones:
Una tinción satisfactoria debe dar los siguientes resultados:
Glóbulos Rojos: rojo amarillento.
Neutrófilos: cromatina púrpura oscuro, citoplasma rosa pálido y gránulos lila.
Eosinófilos: cromatina púrpura oscuro, citoplasma azul pálido y gránulos rojo brillante.
Basófilos: cromatina púrpura oscuro, gránulos azul oscuro.Linfocitos: cromatina púrpura oscuro, citoplasma azul cielo.
Monocitos: cromatina púrpura medio, citoplasma azul grisáceo y gránulos lila Plaquetas: centrómero violeta o púrpura, hialómero azul claro.
2) TINCION DE PERLS
El Fe de depósito se encuentra en el interior de las células en forma de agregados o gránulos de hemosiderina detectables citoquímicamente mediante la reacción de Perls. Estareacción se basa en la liberación de los iones férricos de su unión con las proteínas por la acción del ácido clorhídrico; dichos iones férricos al reaccionar con el ferrocianuro potásico dan un precipitado azul verdoso de ferrocianuro férrico.
Por esta reacción se detecta el Fe hemosiderínico, que es insoluble, pero no el Fe contenido en la ferritina que es hidrosoluble.
Las partículashemosiderínicas se observan en el interior de los eritroblastos (sideroblastos), en algunos eritrocitos (siderocitos) y en los macrófagos medulares, del hígado y del bazo, dónde se acantonan constituyéndose en Fe de depósito. En condiciones normales se observa de un 30 a un 60% de sideroblastos en cuyo interior aparecen de 1 a 4 gránulos distribuidos por la superficie del citoplasma. El aumento en elnúmero de gránulos indica un acúmulo excesivo de Fe y la existencia de una disfunción en su metabolismo; esta disfunción puede conducir a un depósito de Fe en el interior de las mitocondrias, fenómeno que ópticamente se traduce por la disposición de los gránulos hemosiderínicos alrededor del núcleo en forma de collarete constituyendo los denominados sideroblastos en anillo, característicos ydefinitorios de la anemia refractaria sideroblástica, en la que deben hallarse en una proporción superior al 15%.
Este tipo de tinción se usa para valorar de forma directa el hierro de reserva. Al igual que la ferritina sérica, la valoración del hierro medular constituye un criterio diagnóstico de ferropenia prelatente. En esta etapa del desarrollo de la ferropeina se observa una práctica desaparicióndel hierro macrofágico y una disminución significativa del nnúmero de sideroblastos. Además, la observación morfólogica de la extensión teñida mediante May-Grunwald-Giemsa (MGG) permite apreciar un ligero aumento de la serie eritropoyética en la que alguno de sus elementos presenta rasgos moderados de diseritropoyesis ferropénica (hemoglobinización irregular y citoplasmadesflecado, intensa...