tinciones microbiologia

Que es una tincion ¿?
Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopíapara mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. Los diferentes colorantespueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo), poblacionescelulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltar organelas dentro de células individuales.
En bioquímica, esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se una de maneraselectiva ya sea a ADN, proteínas, lípidos, carbohidratos, etc.) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto. Tanto la tinción como el marcado fluorescente pueden servir para los mismos propósitos.
TINCION :consiste en la preparacion organicas de colorantes y grupos que proporciona 
una variedad de colores en los microorganismos u otras sustancias inportantes biologicas como los colorantes de materiales biologicos 
Como se clasifican las tinciones ¿?
TINCION DIRECTA: 
como indicadores de oxidaciones de cambios PH en los medios de cultivo como 
indicadoresde oxidacion para demostrar la presencia o la ausencia de condiciones 
anaerobias o para demostrar la funcion fsiologicas de los microorganismos 
utilizando las tecnicas denominadassupravitales. 

TINCION INDIRECTA: 
se hace inteacciones en primer lugar a un lugar a una sustancia quimica denominada 
merdientea en el sustrato , lo cual prmitela posterior coloacion del colorante. 
el colorante no tiene por si mismo si no que hay que tratar 
con un mordiente. 


Colorante 1 , 2 acido , básico , nauetro ¿? Ejemplos


Que es un frotis ¿?
Es la extension de una muestradeterminada de un liquido o fluido biologico en una laminilla (portaobjetos) de vidrio para realizar estudios microscopicos en la misma. Realizando para ello en ocasiones multiples tinciones.

Como se realiza un frotis ¿?
Fijar los frotis de cultivos con dos gotas de mentanol o etanol absoluto y dejar secaral aire (hacer esto en zonas alejadas del mechero)
Los frotis de cultivos solidoscompletamente secos se fijaran en calor, Para esto se pasara el frotis  rápidamente 2-3 vecesen el interior de la parte amarilla de la flama del mechero 
Palpar la parte inferior del portaobjetos con el dorso de la mano izquierda para enfriar y comprobar que no hubo sobrecalentamiento 




TINCIONES

Especiales :
Tincion en frio o kin yu
En la técnica de Kinyoun se utiliza un agente tensoactivo (alta concentración de fenol en la carbol fuscina) que aumenta la permeabilidad del colorante a través de la capa cérea. Esta alta concentración de fenol permite disolver el material lipídico de la pared celular de la micobacteria, lo cual ocasiona la penetración de la carbolfuscina sin la necesidad de calor

 Procedimiento de la coloración para BAAR (Fuente bibliográfica: Diagnósticomicrobiológico, Elmer W. Koneman, Ed. panamericana).
Procedimiento Ziehl-Neelsen
Procedimiento Kinyoun en frío
Procedimiento Fluorocromo auramina
carbolfuscina: disolver 3 g de fuscina en 10 mL de etanol al 90 -95 %. Agregar 90 mL de una solución acuosa de fenol al 5 %
Carbolfuscina: disolver 4 g de fuscina básica en 20 mL de etanol al 90-95 % y luego agregar 100 mL de una solución acuosa defenol al 9 % (9 g de fenol disueltos en 100 mL de agua destilada).
Auramina fenólica: disolver 0,1 g de auramina O en 10 mL de etanol 90-95 5 y luego agregarla a una solución de 3 g de fenol en 87 mL de agua destilada. Almacenar el colorante en una gaveta marrón.
Alcohol-ácido: agregar 3 mL de HCl concentrado lentamente a 97 mL d etanol 90-95 % en este orden: la solución puede calentarse !!...