Tinciones Simple Y Negativa

PRACTICA Nº 3
TINCIÓN SIMPLE Y NEGATIVA
OBJETIVO
Manejar las técnicas de preparación de frotis, de fijación y coloración simple y negativa utilizadas en el estudio microscópico de cultivosbacterianos; e identificar las principales formas bacterianas.

INTRODUCCIÓN
Los métodos de tinción son de gran utilidad, pero deben usarse siempre con precaución, ya que pueden conducir a errores. Lasmoléculas de colorante forman en ocasiones precipitados o agregados que parecen estructuras celulares auténticas, pero que son formaciones completamente artificiales inducidas por el mismo colorante.La mayaría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadaspositivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son elazul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) que se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, esoscolorantes incluyen la eosina, fucsina ácida y rojo Congo.
La tinción negativa es el reverso del procedimiento de tinción usual: las células se dejan sin teñir, pero el que se colorea es el entorno quelas rodea. Lo que se ve, por tanto, es el perfil de las células. La sustancia utilizada para la tinción negativa es un material opaco que no tiene afinidad por los constituyentes celulares y quesimplemente rodea las células, tal como la tinta china (que es una suspensión de partículas de carbono coloidal) o la nigrosina (un colorante negro insoluble en agua).La tinción negativa es un modosatisfactorio de aumentar el contraste de las células en la microscopia óptica, pero su máxima utilidad está en revelar la presencia de cápsulas alrededor de las células bacterianas.

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