TINCIONES

Actividad 1- Describir las funciones diferenciales y selectivas más comunes en bacteriología
TINCIONES DIFERENCIALES
Las tinciones diferenciales son aquellas tinciones que se usan para diferenciar de manera mas explicita los microorganismos. Estas tinciones utilizan los colorantes diferenciales, que se componen de más de una sustancia tintórea. En algunas técnicas de coloración, las tincionesdiferenciales más importantes que se emplean en bacteriología son las de Gram y la tinción ácido-resistente. Ambas tinciones se utilizan para obtener información acerca de la composición de las capas de la pared celular de las células bacterianas

TINCION DE GRAM

La tinción de gram o coloración de gram es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología para la visualización debacterias, sobre todo en muestras clínicas. Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram, que desarrolló la técnica en 1884. se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose gram positiva a las bacterias que se visualizan de color violeta y bacteria gram negativa a las que sevisualizan de color rosa.

Técnica :

Preparar el frotis y fijarlo al calor
Colocar la preparación fijada con la solución de cristal violeta durante l’
Lavar con solución yodada (Lugol )
Cubrir el frotis con Lugol durante 1’
Escurrir y decolorar por alcohol hasta que no arrastre más cristal violeta.
Lavar con agua
Contrastar con la solución de fucsina por 1’
Lavar con agua, secar al airey examinar con objetivo de inmersión

Las tinciones se usan para tres cosas fundamentalmente:
Descripción de microorganismos en base a su morfología, estructura y distribución.
Detección de determinados microorganismos para diagnostico clínico, por ejemplo.
Clasificación de microorganismos según sus características tintoriales.
Tipos de colorantes:
Ácidos:
En disolución se cargannegativamente por eso se unen a estructuras cargadas positivamente y no las células, que tienen carga negativa.
Sales de Na. K, Ca, ión amonio, eosina, rojo congo, rosa bengala, fucsina ácida...
Básicos:
En disolución se cargan positivamente uniéndose a estructuras con carga negativa como las células.
Cloruros, sulfatos, azul de metileno, cristal violeta, verde malaquita, fucsina fenicada ocarbol-fucsina...
Características de un cultivo para una buena tinción:
Ha de estar en fase exponencial de crecimiento y no ser viejo.
Debe haberse obtenido de un cultivo sólido, para tinciones simples puede ser necesario usar un cultivo liquido.
Preparación de un frotis:
Suspensión de una colonia de un cultivo puro en una gota de agua.
Extensión de la gota en un porta, con ayuda de otro porta, en laparte central del primero.
Secado al aire.
Fijación a la llama para deshidratar la muestra. Se hace pasando tres veces el porta por la llama rápidamente.
Tipos de tinciones:
Simples: se usa un solo colorante disuelto en solución acuosa o alcohólica, y se suplementan con un mordiente para una mejor fijación del colorante además de aumentar el grosor de algunas estructuras para su mejor visión.Sirven para ver la morfología y las agrupaciones que forman los microorganismos entre ellos y con otras células.
Diferenciales. Se usa mas de un colorante. Tiñe de diferente modo a las células de distintas especies.
Tinciones simples y diferenciales:
Tinciones simples:
tinción negativa: se usa un colorante ácido, nigrosina o tinta china, que no entra en la célula de modo que estas no seobservan teñidas, lo que se ve de color es el fondo.
Frotis.
Secado al aire
Colorante.
Visionado a 100X
tinción básica: se usa azul de metileno que si tiñe a las células.
Frotis.
Fijación.
Colorante.
Lavado con agua destilada.
Secado al aire.
Visionado a 100X.
Tinciones diferenciales:
tinción Gram: se basa en las diferencias entre las paredes de las Gram + y las Gram - , el primer...