Tinciones

PLANTEL Nº 5

=CAPACITACION DE LABORATORISTA QUIMICO=`
Preparación de soluciones y colorantes que se utilizan en el análisis físico, químico, microbiológico.
Preparala tinción de Gram, Tinción Giemsa, azul de metileno, etc.




PRACTICA # 3
Colorantes, mordientes e indicadores.

INTEGRANTES DE EQUIPO:
* EDGAR ARTURO BRITO DE LA CRUZ.
* MARIANA ALEJANDRA CABRERAJIMENEZ.
* YARISOL HERNANDEZ FLORES.
* VIRIDIANA DEL CARMEN JIMENEZ PEREZ.
* JHOVANNY PAQUISTAN GARCIA.
* LIRIO NOEMI PECH MEDRANO.

SEMESTRE:5ºGRUPO:ATURNO:VESPERTINO.

DOCENTE:ING. ALEJANDRO EMMANUEL DE LA CRUZ TRUJILLO.

* Objetos de aprendizaje:
Preparar soluciones.

* Competencia:

a) Preparar un colorante (tinción de Gram).
b)Preparar un indicador (Fenolftaleína).
c) Preparar soluciones limpiadoras.










* Marco teórico
Los colorantes utilizados en microbiología son compuestos orgánicos que contienen grupos cromoforos y auxocromos unidos a anillos aromáticos.
La presencia de grupos cromoforos en una molecular (grupos azo, nitro, etc.) no es suficiente para que esta actué comocolorante, esto es que se fije a las estructuras a colorear. Para ser colorante debe poseer grupos que sean capaces de asociarse llamados auxocromos. Por ejemplo el 1, 3, 5trinitrobenceno, es un compuesto coloreado pero no es un colorante. Sin embargo, si se reemplaza un H por un OH en el anillo bencénico, se obtiene el acido pícrico que también es coloreado pero al poseer un grupo disociable (auxocromos)actúa como colorante.
La distinción entre colorantes ácidos y básicos depende de la carga de la parte de la molécula responsable del color. Si es negativo se trata de un colorante acido y si es positiva se trata de un colorante básico. Esta diferencia es importante debido a que, según sean ácidos o básicos, los colorantes tendrán afinidad por diferentes zonas de la anatomía celular.Algunos colorantes utilizados comúnmente en Microbiología son fucsina básica, cristal violeta, safranina, azul de metileno, etc.
* Los pasos fundamentales previos a una coloración son: extendido, secado y fijado.
a) Extendido: Se coloca una pequeña porción de la muestra en un portaobjetos y se extiende con el ansa en forma de ovalo. Para muestras provenientes de medios sólidos, debecolocarse previamente una gota de agua sobre el portaobjetos.
b) Secado: Puede dejarse secar el extendido a temperatura ambiente, o colocar a 30 – 40 cm sobre la llama del mechero.
c) Fijado: La fijación tiene como finalidades evitar el desprendimiento del preparado durante la coloración así como también preservar la forma original de los microorganismos.
El procedimiento más común espasar el preparado 3 veces por la llama del mechero.Sin embargo, esta técnica no es conveniente para ciertas coloraciones para las cuales deben



Utilizarse procedimientos más suaves. Algunos agentes fijadores utilizados son etanol, metanol, formol sales de mercurio, tetroxido de osmio, acido pícrico, etc. Debe tenerse en cuenta que, luego del procedimiento de coloración, los preparadospueden contener microorganismos viables, en especial si hay esporas. Por consiguiente siempre deben considerarse potencialmente riesgosos y manejarse con precaución.
La fenolftaleína es un compuesto químico orgánico que se obtiene por reacción del fenol (C6H5OH) y el anhídrido ftálico (C8H4O3), en presencia de acido sulfúrico.
En farmacología y terapéutica se utiliza como laxante catar. EnMéxico y otros países, a pesar de que se ha limitado su uso como medicamento dada la suposición de que tiene efectos cancerígenos, fue incorporado a la farmacopea homeopática y se sigue vendiendo en las farmacias como especialidad homeopática.
En análisis clínicos, la fenolftaleína se utiliza como agente de diagnostico para investigar la función renal y en la determinación de orina residual en la...