Tinciones

Tinciones
Para estudiar las bacterias, se necesita el uso de tinciones, puesto que estas son incoloras y refringentes de tal manera que sería muy difícil observarlas al microscopio de luz.Los colorantes además de tener la propiedad de impartir color, deben ser resistentes a la luz y al lavado, así como también la propiedad de unirse a un material por medio de una reacción química odepositarse sobre dicho material. Todos los colorantes son de naturaleza orgánica, principalmente aromáticos.
La estructura química de los colorantes se encuentra dividida en dos grupos:1. Grupo Cromoforo. grupo químico, que confiere a la molécula la propiedad de proporcionar color
2. Grupo Auxocromo. Grupo químico que suministra las propiedades de forma sales y de trasferirel color de un colorante a una sustancia sobre la cual actúa.
Según el tipo de grupo auxocromo, los colorantes se dividen en 2 clases:
A) Colorantes básicos, que tienen el grupo auxocromoNH2 (amino).
B) Colorantes ácidos, que presentan el grupo zuxocromo SO3H (sulfonico), COOH (carboxilo).
Preparación del frotis:
1. Preparar el frotis bacteriano de la siguiente manera:a. En un portaobjeto perfectamente limpio y desengrasado, coloque sobre él una pequeña gota de agua con el asa bacteriana.
b. Trabajando cerca del mechero, tomar con el asa pococrecimiento de klebsiella pneumoniae, y hacer una emulsión con la gota de agua sobre el portaobjeto extendido. El asa bacteriológica, deberá ser esterilizada al calor antes y después de este paso.c. Hacer lo mismo que en el paso b) con staphylococcus aureus y colocarlo en la misma gota donde fue puesta klebsiella pneumoniae, con el fin de realizar una mezcla bacteriana de grampositivo ygramnegativo. Esterilizar el asa antes y después de este paso.
d. El porta objeto con la muestra bacteriana se fija al calor, pasándola por la flama del mechero 2 o 3 veces sin calentar mucho