Tinción De Baar

COLEGIO DE ESTUDIOS CIENTÍFICOS Y TECNOLÓGICOS DEL ESTADO DE GUERRERO

Modulo: II

Submódulo: Aplica técnicas parasitológicas

Práctica: Tinción de BAAR (Zihel Nilsen)

Nombre: Yuliza Fernanda Jiménez Vergara

Grado y grupo: 3°A

Especialidad: Técnico Laboratorista Clínico (TLC)

Fecha de entrega: 11/10/12

INTRODUCCIÓN
La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tincióndiferencial rápida y económica, para la identificación de microorganismos patógenos, por ejemplo M. tuberculosis. Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes, Franz Ziehl (1859 a 1926), un bacteriólogo y Friedrich Neelsen (1854 a 1894), un patólogo.
Este procedimiento es empleado para las bacterias que son difíciles de teñir con los colorantes básicos porque se muestran impermeables ala coloración. Solamente utilizando colores energéticos como la fucsina fenicada, y forzando su aplicación mediante la utilización de calor prolongando el tiempo de contacto, estas bacterias logran retener el colorante. Y lo hacen de tal manera que los decolorantes fuertes como el alcohol y los ácidos no consiguen decolorarlas. Por eso se les llama bacterias ácido-alcohol resistentes (BAAR).
Lasparedes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistente. La propiedad de la acido-alcohol resistencia no se conoce a fondo, pero se sabe que sololas células intactas con alto contenido lipídico poseen este carácter, dependiente de la mayor solubilidad del colorante fenicado en los lipoides celulares que en el decolorante. Las micobacterias son las BAAR por excelencia. El contenido lipídico de las micobacterias, compuesto por fosfolípidos y ceras, principalmente, alcanza hasta un 40% de su peso seco total. En la fracción insaponificable delas ceras se encuentran sustancias de elevado peso molecular como el acido micólico, que parece ser el responsable de la acido-alcohol resistencia. Las células se tiñen de rosa, tanto las ácido – alcohol sensibles como las resistentes. Después se usa un decolorante orgánico que hace que las bacterias ácido – alcohol sensibles se decoloren mientras que las ácido – alcohol resistentes se quedanrosa. En la tinción de Gram se utiliza un colorante de contraste que en este caso es el azul de metileno que tiñe las células ácido – alcohol sensibles de color azul quedando las células ácido – alcohol resistentes de color rosa. Las micobacterias como M. tuberculosis y M. marinum y los parásitos coccídeos como Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia.La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energía cinética de las moléculas del colorante lo cualtambién facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloración son de color rojo y la que no se ven de color azul, ya que se utiliza azul de metileno como tinción de contraste.
Objetivo

Identificar bacilos acido-alcohol resistentes

Material

* Bata de laboratorio
* Cerillos
* Papel de estraza
* Guantes
* Cubre bocas
* Portaobjetos
*Fucsina
* Alcohol-Acido
* Azul de metileno o verde malaquita
* Mechero (o en su defecto torunda con alcohol)
* Microscopio

Procedimiento:

*Poner papel de estraza en el área que será designada para el procedimiento
*Establecer tu material de barrera adecuadamente (mechero en medio)
Y ahora si se procede a preparar la muestra:
1. La muestra puede extenderse directamente en...