Tinción Gram

TINCION DE GRAM
Gordillo Melania*, Navarrete Yenifer*, Obaco Viviana*, Veintimilla Nathaly

*Profesionales en Formación, Ciencias de la Salud, Titulación de Bioquímica y Farmacia, Universidad Técnica Particular de Loja, San Cayetano Alto s/n C.P. 11 01 608; Loja, Ecuador.

Resumen
El principal impedimento en la observación de bacterias en microscopio óptico es la falta de contraste entrela célula en observación y el medio que la rodea, la manera más simple de facilitar el contraste es la utilización de colorantes, revelando la presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas, paredes celulares, centros de actividad respiratoria, etc. En este caso hacemos referencia a la tinción de Gram; es usada para clasificar bacterias sobre la base desus formas, tamaños, morfologías celulares y reacción Gram (color). A nivel del laboratorio es útil como test para un rápido diagnóstico presuntivo de agentes infecciosos, tanto en muestras como en cultivos en crecimiento, y adicionalmente sirve para valorar la calidad de la muestra clínica.
Palabras clave: Tinción de Gram, observación de bacterias.
Abstract
The main impediment in theobservation of an optical microscope bacteria is the lack of contrast between the cell observation and the surrounding medium, the simplest way is to facilitate the use of contrast dyes, revealing the presence of specific cellular constituents such as flagella, spores, capsules, cell walls, respiratory activity centers, etc.. In this case we refer to the Gram stain, is used to classify bacteria based ontheir shapes, sizes, and Gram reaction cell morphologies (color). In laboratory tests is useful as a test for rapid presumptive diagnosis of infectious agents, both in samples and in growing crops, and further used to assess the quality of the clinical sample.
Keywords: Gram stain, bacteria watching in vitro.
Introducción
Los colorantes son colorantes orgánicos, complejos que están constituidosfundamentalmente por radicales cromóforos (parte o conjunto de átomos de una molécula responsable de su color) y auxócromos (son grupos cargados positivamente que intensifican una sustancia o cromóforo en la síntesis de colorantes). Los primeros son los que imparten color y los segundos de las interacciones con los sustratos por teñir (B.T, 06 de 2010).
Las tinciones se usan para tres cosasfundamentalmente para: descripción de microorganismos en base a su morfología, estructura y distribución, detección de determinados microorganismos para diagnóstico clínico, por ejemplo, clasificación de microorganismos según sus características tintoriales.
Los mecanismos de captación de los colorantes son una combinación de fenómenos físicos y químicos, como adsorción, absorción, capilaridad,ósmosis, afinidad química e intercambio iónico (S, 02 de 2013).
Las técnicas de unciones microbiológicas se clasifican en simples y diferenciales, en las primeras se aplica un solo colorante que tiñe todas las estructuras celulares y por lo tanto todas la células sin distinción.
La tinción de Gram o coloración Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología para la visualización debacterias, sobre todo en muestras clínicas.
Las bacterias que resisten la decoloración permanecerán de color azul-violeta, interpretándose como Gram positivas. Por otro lado las bacterias que no resisten la coloración aceptaran el colorante de contraste, observándose de color rojo, se interpretan como Gram negativas (B.T, 06 de 2010).
Clásicamente los reactivos utilizados para la realización de latinción de Gram han sido el cristal violeta como colorante inicial, la solución de lugol para acomplejar a éste, el alcohol y/o acetona para la decoloración y la safranina o fucsina básica como contracolorante.

Materiales y Métodos

Lo primero que hicimos fue la preparación del frotis, para lo cual se realizó una limpieza de la placa con la que trabajamos (portaobjetos) para que esta se...