Tinción Simple

I. INTRODUCCION

Una de las características más importante de las bacterias es su morfología, definida por el tamaño, la forma, el arreglo y la estructura. Existen bacterias en forma redondeada denominadas cocos, en forma cilíndrica, denominadas bacilos y una tercera morfología como son las que tienen forma de espirales, denominadas espirilos. A su vez cada categoría puede subclasificarse conbase a diferentes arreglos.
Estas características pueden determinarse examinando muestras al microscopio. Las células no teñidas son prácticamente transparentes, pero pueden observarse al microscopio de luz haciendo preparaciones entre lámina y laminilla o con microscopios especiales como por ejemplo: de contraste de fases o de campo oscuro.
Cuando se dispone de un microscopio de luz, se puedenteñir las bacterias para facilitar su visualización.
Si se tiñe una muestra del cultivo extendida y fijada en una lámina portaobjeto con un colorante dado, las células adquirirán el color del colorante añadido y podrá observarse la forma, tamaño y el arreglo de las mismas. Este tipo de coloración se conoce con el nombre de coloración simple.

II. OBJETIVOS

* Realizar diferentespreparaciones microbiológicas a partir de cultivos puros.
* Realizar frotis fijos y tinciones simples.
* Identificar la forma, tamaño y agrupamiento que presentan los organismos aplicando un método simple de tinción.

III. REVISIÓN BIBLIOGRAFICA

4.1. BACTERIAS
Son microorganismos unicelulares que pueden habitar los lugares más extremos, siendo los más abundantes y simples de latierra. Son organismos procarioticos que se encuentran en una gran variedad de tamaños y formas:
* Coco .
* Diplococo: cocos en grupos de dos.
* Tetracoco: cocos en grupos de cuatro.
* Estreptococo: cocos en cadenas.
* Estafilococo: cocos en agrupaciones irregulares o en racimo.
* Bacilo
* Formas helicoidales:
* Vibrio:ligeramente curvados y en forma de coma, judía o cacahuete.
* Espirilo: en forma helicoidal rígida o en forma de tirabuzón.
* Espiroqueta: en forma de tirabuzón (helicoidal flexible).
La bacteria está compuesta por un nucleoide que contiene una molécula circular de ADN, su citoplasma contiene plásmidos , vacuolas y ribosomas.

4.2. TINCIÓN
La tinción o también llamadacoloración es un método auxiliar en microscopia para poder observar mejor las bacterias a través de un microscopio. La tinción es un proceso en el cual se utilizan colorantes sobre determinada muestra para poder cuantificar la presencia de este.
Tenemos la tinción directa cuando el sustrato actúa directamente con el colorante y la indirecta donde el sustrato pasa por un proceso químico antes deentrar en contacto con el colorante para así dar un mejor resultado.

IV. MATERIALES Y MÉTODOS

5.3. Preparación de una muestra fija de bacterias para tinción

Los materiales utilizados fueron:
* Se tuvieron 3 muestras de contenido de bacterias: Bacillus sp, Staphylococcus aereus y Escherichia coli.
* Asa dekohle
* Lámina portaobjetos
* Mechero
* Piseta con aguaSe coloca una gota de agua sobre la lámina portaobjeto (previamente desengrasada con alcohol).

Fig1. Procedimiento para preparación de una muestra fija de bacterias para tinción

Fijar la muestra secándola con ayuda del mechero.
Una vez terminado esterilizar el asa de kohle en el mechero
Distribuir la gota cargada con la muestra en la lámina.
Con ayuda del asa de Kohle sacar unamuestra del cultivo, cerca del mechero para crear un ambiente estéril.
Secar la lamina en el mechero
Esterilizar el asa de kohle en el mechero

4.2. Tinción simple con colorantes básicos.

Los materiales utilizados fueron:

* L áminas fijadas con microorganismos: Bacillus sp, Staphylococcus aereus y Escherichia coli.
* Aceite de inmersión
* Colorantes básicos: azul de metileno...