tinsion gram


Reactivos Necesarios
Portaobjetos
Agua destilada
Pipetas Pasteur, haza, Mechero.
Cristal Violeta
Lugol
Alcohol acetona
Safranina (u otra tinción de contraste)Procedimiento:
Colocar una pequeña gota de Agua destilada en el portaobjetos (con pipeta por ejemplo)
Re-suspender muestra en el portaobjetos. Secar al mechero.Procedimiento: Tinción Se debe colocar Cristal Violeta cubriendo toda la muestra por 1min (variable según lab.)
Luego debe agregarse el lugol. Este debe aplicarse como elcristal violeta y también debe cubrir la muestra por 1 min. Luego se lava con agua corriente.
Se lava con agua corriente
El cubrir la muestra con alcohol acetona paradecolorarla es el paso más critico del procedimiento. Este debe cubrir la muestra por el tiempo que puede ir de 15s a 30s según corresponda y la reacción debe ser detenida conel lavado con agua corriente. El tiempo debe ser el mismo para todas las muestras.
El último paso consiste en agregar una tinción de contraste, para teñir las bacteriasque pierden el cristal violeta. Para esto se agrega safranina cubriendo la muestra por 15s o por 1min, dependiendo. Luego se lava con agua corriente y se deja secar.Resultados: Microscopía
Bacterias Gram negativas:
Corresponden a las bacterias que pierden la coloración del cristal violeta después del alcohol acetona y se tiñen conel colorante de contraste (safranina), lo que les da un color rosáceo/rojizo
Esto corresponde a Bacilos Gran Negativos En nuestro caso usamos la muestra numero n°3 y alseguir todos estos paso de manera correspondientes pudimos apreciar como muestra en la foto que son Bacilos Gram – esto lo sabemos por su tinción y por su forma.