tision hematoxilina

TINCIÓN HEMATOXILINA – EOSINA PARA LA FIJACIÓN DE TEJIDOS.

Para el Portaobjetos que contiene la muestra:
1. Pasar por dos Xiloles (durante 5 minutos en cada xilol).
2. Pasar por alcohol al100% - Xilol. (en la misma proporción: p. ej. 10ml de alcohol por 10 ml de xilol). (Durante 5 minutos).
3. Pasar por 2 alcoholes al 100% (para el 1° alcohol 5 min, para el 2° 3 min.).
4. Pasar por 2alcoholes al 96% (para el 1° alcohol 5 min, para el 2° 3 min.).
5. Se enjuaga con agua de la llave, para eliminar cualquier residuo de las sustancias anteriores (2 o 3 min. Para asegurar se eliminenlos residuos)
6. Se sumerge en Hematoxilina 15 min.
La hematoxilina no posee fijación por los tejidos por lo que hay que añadir un mordiente que actúe como vinculante entre el tejido y elcolorante, acrecentando la unión entre ambos. Se agrega acido acético. La hematoxilina usada en la práctica no requirió de agregar acido acético, debido a que ya se encuentra como stock, esto es, lista parautilizarse, se conoce como Hematoxilina de Harris ).
7. Enjuagar, sumergiendo con agua de la llave (2 minutos).chorro de agua
8. Pasar por Alcohol al 100% (4 a 5 minutos p/ quitar exceso de agua).9. Pasar por Alcohol ácido.( 1-3 SEGUNDOS )
Preparación de alcohol acido: se mezclan 740 ml. De alcohol al 96% y 240 ml. De agua destilada, finalmente se agregan 2 ml. De HCl concentrado. (pH – 1 a2)
10. Sumergir 10 minutos en agua (observar un vire de morado – azul).
11. Sumergir en Eosina durante 3 minutos.
La preparación de la eosina se realiza en dos pasos:
Paso uno: se mezcla 1 gr. Deeosina en 20 ml. De agua destilada y 80 ml. De alcohol al 95 %, a esta preparación se le denomina Stock.
Paso dos: se toma una parte del Stock y se mezcla con tres partes de alcohol al 80%. Mas 0.5ml. De acido acético por cada 100 ml.
Esto es, si se toma los 100 ml. Preparados en el paso uno, agregar 300 ml de alcohol al 80%, más 2 ml. De acido acético.
12. Pasar por Alcohol al 96% (5...