Tomografía crioelectrónica

TOMOGRAFIA
CRIOELECTRÓNICA Y VIH.
Métodos instrumentales en bioquímica y biología molecular II


3º Bioquímica

INDICE:
A. Tomografía crioelectrónica…………………………....................3
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Definición……………………………………………....……....3
Descubrimiento…………………………………….……...…..3
Método y explicación de la técnica……………………….....4
Ventajas e inconvenientes……………………….…….…….4Utilidades…………………………………………………….....4
Procedimiento……………………………………….….……...5
Qué se espera de ello en el futuro…………………..………6

B. Tomografía crioelectrónica y VIH……………………………..….7
1. VIH…………………………………………………………..…...7
2. Características del virión…………………………………..…..7
3. Maduración y transfeccion del RNA viral a la célula
huésped……………………………………………………..…..7
4. Ciclo de vida delvirus…………………………….………..…..8
5. Aplicaciones……………………………………….………..…..8
C. Artículo donde se ha realizado la técnica………………………..8
1.
2.
3.
4.
5.

Descripción…………………………………………..……….....8
Objetivo……………………………………………..………..…..9
Estructura……………………………………...……….........…..9
Visualización en 3D de viriones de VIH intactos……….….10
Imágenes obtenidas del virus mediante la técnica de la
tomografia microelectrónica………………………………......11
6.Conclusión……………………………………………..............12
D. Bibliografía……………………………………………………..……13

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A. TOMOGRAFIA CRIOELECTRONICA:

Figura 1. Ejemplo de imagen tomada mediante la
técnica de tomografía crioelectrónica.

1. Definición de la técnica:
La microscopía crioelectrónica es una técnica de observación que permite
apreciar de forma inalterada pequeñas estructuras mediante la captación de
los electrones que incidensobre ellas.
Actualmente, las técnicas que utilizan microscopia crioelectrónica están
creciendo, pero yo me voy a centrar únicamente en una de ellas: la tomografía
crioelectrónica.
La tomografía crioelectrónica o Cryo-ET es una nueva técnica de imagen que
permite observar estructuras biológicas como macromoléculas, virus o incluso
pequeñas células completas de una forma muy parecida a suforma nativa
debido a que son criogenizadas. Las imágenes se recogen en 2 dimensiones,
pero se convierten a tres dimensiones.
Es una técnica que permite recoger imágenes hasta 2 nm de resolución, por lo
que queda cubierto el vacio que hasta ahora había. El microscopio óptico
únicamente llegaba hasta unas 20m y las criotécnicas tradicionales abarcaban
desde 0.5 y 2 nm

2. Descubrimiento de latécnica:
En 1984 Jacques Dubochet y su equipo estaban tratando de crear hielo vítreo
como otros tantos equipos de físicos en el mundo desde principios de los 80.
En una de sus publicaciones demostraron que habían conseguido aislar
adenovirus incrustado en una capa vitrificada de agua. Así nació la microscopía
crioelectrónica, pues se pudieron observar microorganismos a microscopioelectrónico sin necesidad de tratarlos histológicamente. Con los años se han
ido mejorando las técnicas y combinándose con otras, por lo que se ha

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conseguido finalmente lo que actualmente es posible, como por ejemplo la
tomografía crioelectrónica.
3. Método y explicación de la técnica.
La tomografía crioelectrónica o Cryo-ET (electron cryotomography) es una
combinación de otras tecnologías deobservación y conservación histológicas
más básicas. Podemos dividir la palabra y cada parte nos describe una de las
tecnologías utilizadas.
“Tomografía” es una técnica de imagen en la cual se hace una reconstrucción
de un objeto (o en nuestro caso ser vivo o virus) en más dimensiones de las
que realmente se pueden observar. Esto se realiza gracias al cálculo
matemático realizado porprogramas preparados para ello.
“Electrónica” se utiliza porque la obtención de imágenes se realiza en un
microscopio electrónico de transmisión.
El término “crio” se refiere al hecho de que la muestra ha sido fijada con bajas
temperaturas y permanece fría mientras está siendo fotografiada. Con la
congelación lo que se permite es que la muestra se...