Trabajo Bioquimica

Enzimología I

















Introducción
Las enzimas son catalizadores específicos y potentes que posibilitan la coexistencia de un elevado número de reacciones químicas dentro de la célula. En la mayoría de los casos son denaturaleza proteica, pero también se conocen algunas que son RNA. Muy a menudo, los grupos funcionales de las enzimas son complementados con cofactores: iones inorgánicos (metales) o moléculas orgánicas (coenzimas), que contribuyen a ampliar el espectro de mecanismos posibles. Hay diversos factores químicos que pueden justificar las altas velocidades alcanzadas por las enzimas en las condicionesde pH y temperaturas propias de la célula. La complementariedad de la enzima con la con la geometría del estado de transición de la reacción es la causa más notable de su poder catalítico. (1)
Además de las enzimas son biocatalizadores los oligoelementos, vitaminas y hormonas. En los sistemas biológicos es imprescindible la presencia de enzimas, ya que la temperatura y el pH del organismodeterminan unas velocidades de reacción insuficientes para las exigencias de la vida, ya que se producirían con una gran lentitud que no permitiría la actividad vital como es el caso de la contracción muscular, generación de impulsos nerviosos, etc. De esta forma se consigue hacer compatible la vida con las reacciones químicas, que sin la presencia de enzimas requerirían unas condiciones imposibles decompatibilizar con el proceso vital. Así por ejemplo durante una carrera de maratón, las enzimas hacen posible la degradación de la grasa y con ello la obtención de energía para la contracción muscular a 37 ºC de temperatura. Sin la presencia de biocatalizadores, la combustión de la grasa se produce en torno a los 700ºC. (2)
Objetivos:
1) Realizar experimento de variaciones de pH y temperatura,distinguir las variaciones de los colores que se producirán en los tubos.
2) Entender que significa que un tubo tenga un color más oscuro y un color más claro saber cuál es el que sufrió una hidrolización y cuál es la enzima más efectiva.





Materiales y Métodos





Resultados

Tabla Nº1: Composición de soluciones.
Columna1 Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6
BufferpH 5 pH 7 pH 9 pH 5 pH 7 pH 9
Amilasa 2ml 2ml 2ml ¬- - -
Almidón 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
Composicion de los tubos con soluciones a distinto pH cada un, en temperatura ambiente.
Figura 1. Tinción del almidón, coloracion dependiente de los variaciones de pH que se expusireron las enzimas, para observar su efectividad.
Tabla Nº2: Composición de soluciones.Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6
Buffer pH7 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
Amilasa 2ml 2ml 2ml 2ml - -
Almidón 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
T°C 0°C T.A. 37°C 100°C 37°C 100°C
Composición de los distintos tubos en el experimento, exponiendolos en distintas temperaturascon con mismo pH.
Figura 2. Tinción del almidon, dependiendo de la efectividad de la enzima adistintas temperaturasy comprobar su eficacia.


Discusión
En los procedimientos para determinar la actividad de una enzima, en los tubos 1, 2 y 3 fueron los que basamos nuestros resultados para determinar si afectaba el pH en la actividad de la amilasa salival, mientras los tubos 4, 5 y 6 fueron blancos (Tabla Nº1), es decir, utilizados para comparar los resultados obtenidos anteriormente(Figura 1). Este procedimiento también se utilizo para la experimentación de temperatura para medir la efectividad de la amilasa en distintas temperaturas, realizándolo igualmente con 6 tubos. Los tubos 1, 2, 3 y 4, se ocuparon experimentalmente y 5 y 6, fueron de control (Tabla Nº2).
El objetivo que se trazo para la realización de este práctico se logro casi satisfactoriamente. Ya que se observaron...