trabajo
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONÍA PERUANA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
DEPARTAMENTO ACADEMICO DE CIENCIAS BIOMEDICAS Y BIOTECNOLOGIA
INFORME DE LABORATORIO
TITULO : Ensayo de la hidrolisis del almidón por amilasa salival
Evaluación de los procesos metabólicos en la levadura.Evaluación de la Succionato Deshidrogenasa
FACULTAD : Ciencias Biológicas
ESCUELA :Biología
DOCENTE: Blgo. Juan Carlos Castro Gómez (Doctor).
GRUPO DE TRABAJO :
EncinasYupe Carlos Mark
Garay Trigoso Cinthia Karoly
Torres Oyarce León Cachorro Fernando
Tuesta Pérez Gabriel Antonio
FECHA DE ENTREGA : 07de Julio 2012
IQUITOS-PERÚ
2012INTRODUCCIÓN:
La enzima succinato deshidrogenasa (SDH.E.C.1.3.99.1) en una flavoproteína que practicipa en el ciclo de Krebss y al estar asociada a la membrana mitocondrial interna, tanbien forma parte la cadena de transporte electrónico mitocondrial. La SDH cataliza estereoespesificamente la deshidrogenacion en trans del acido succínico hadtaacidofumarico. Esta enzima se inhibe por malonato ymaleato, que son análogos de estruccurales de succinato
El proceso de digestión y transporte de carbohidratos es complejo, cuyos mecanismos bioquímicos y moleculares fueron elucidados gradualmente. En el caso de los polisacáridos se sabe que su digestión es mediante la hidrolisis gradual, proceso en el que participan varias enzimas como las amilasas salival y pancreática, oligosacaridasas ydisacaridasas.
El proceso de metabolismo de los polisacáridos a través de diferentes vías metabólicas en las que se da síntesis y degradación, consumo y producción de ATP. Este proceso empieza con la degradación de un polisacárido hasta un monosacárido (glucosa). La glucosa entra a diferentes vías, en este caso trataremos el de las siguientes vías:
Glucolisis: en esta vía se la producción depiruvato a partir de la glucosa.
Descarboxilación oxidativa del piruvato: el piruvato obtenido en la glucolisis se descarboxilara desprendiendo CO2 y formando Acetil-CoA.
Ciclo de Krebs: el Acetil-CoA entrara al ciclo y pasara por una serie de reacciones, desprendiendo por alguna de sus reacciones exergonicas ATP, NADH2, FADH2 .
Cadena transportadora de electrones: El NADH2, FADH2 desprendidodel ciclo de Krebs donara sus electrones a sus los diferentes complejos de la cadena tranportadora de electrones para la producción de agua.
MATERIALES:
Tubos de ensayos
Gradilla
Pipetas
Micropipetas
Balanza
Matraz
Centrifuga
Cubeta
Espectofotometro
Rotulador
Vaso de precipitado
Mortero y pilón
Microtubos (cachitos)
Estuche de disección
Pepel secante
AlgodónEmbudo
Detergente
Jeringa
Aguja de jeringa
Varilla de vidrio
REACTIVOS:
Cloroformo
Alcohol
Solución buffer fosfato
Solución de almidón 1.5%
Hielo
Amilasa salival
Lugol
Azul de metileno
Levadura
Sol. Glucosa
Sol. Acido pirúvico
Sol. Ácido cítrico
Sol. Ácido succínico
Agua destilada
Sacarosa
Sobrenadante de hígado
Sobrenadante de musculo
Reactivo de Benedíct
METODOSPROCEDIMIENTO 01: Ensayo de hidrolisis de almidón por amilasa salival
1. Poner en un 1° tubo de ensayo 1ml de agua destilada y en un 2° tubo 1ml de saliva.
2. Añadir a los 2 tubos 2 ml de almidón al 5%, homogenizar las soluciones por inversión del tubo.
3. Incubar por 15” a temperatura ambiente.
4. Al cabo de dicho tiempo pones 2 gotas de lugol, homogenizar.PROCEDIMIENTO 02:
1. Rotular 7 tubos de ensayo
2. Colocar en cada tubo 0.5ml de azul de metileno
3. Luego añadir a cada uno 1ml de levadura
4. Al 1° tubo añadir 2ml de agua(tubo de control)
5. Al 2° tubo añadir 2ml de solución de almidón
6. Al 3° tubo añadir 2ml de solución de glucosa
7. Al 4° tubo añadir 2ml de solución de ácido pirúvico
8....
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