Trabajos dificiles

Hay dos tipos principales de microscopio: el microscopio de luz y el microscopio de electrones. El
microscopio de luz usa un rayo de luz para iluminar los objetos, que son entonces magnificados y enfocados
por lentes de cristal. Los microscopios de luz más comunes son el estereoscopio (microscopio de
disección) y el microscopio compuesto. El estereoscopio se utiliza para observarobjetos relativamente
grandes, de aproximadamente 0.05 a 20 milímetros. El microscopio compuesto se utiliza mayormente para
estudiar objetos o secciones finas, entre aproximadamente 0.2 a 100 micrómetros
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. Para ver más detalles se
usan tinciones que resaltan partes de lo que deseamos estudiar o se emplean microscopios especializados.
Entre los microscopios especializados que usan unafuente de luz están el microscopio de campo oscuro, el
microscopio de contraste de fases y el microscopio de fluorescencia. Los microscopios de campo
oscuro y de contraste de fases se usan para observar organismos, vivos o muertos, que no pueden teñirse.
En el microscopio de campo oscuro, la luz no pasa directamente a través del organismo y sólo se observa la
luz reflejada de la muestra,por lo cual ésta se verá brillante sobre un fondo oscuro. En el microscopio de
contraste de fases, el índice de refracción de la luz es mayor en la muestra que en el medio donde se coloca,
lo cual hace que ésta se vea oscura sobre un fondo claro. El microscopio de fluorescencia usa luz
ultravioleta en vez de luz visible; los organismos o células con compuestos fluorescentes emiten luzvisible al
iluminarlos con luz ultravioleta, por lo cual brillan sobre un campo oscuro

Microscopía de epifluorescencia
Algunas moléculas o átomos son capaces de absorber energía, pasando de un
estado basal a uno excitado o energizado, y rápidamente volver a un estado
basal mediante la emisión de luz o calor. Cuando el decaimiento ocurre
mediante la emisión de luz el fenómeno sedenomina fluorescencia. Las
moléculas que exhiben este comportamiento son denominadas fluorocromos, y
cada uno es capaz de excitarse a una determinada longitud de onda y emitir a
otra longitud de onda distinta y mayor a la de excitación. Estas moléculas se
utilizan en microscopía de fluorescencia para marcar ciertas estructuras
celulares destacándolas del resto de los elementos que componen lacélula.
Esto permite identificar distintas moléculas o conjuntos de moléculas. El
fluorocromo puede tener afinidad por distintos elementos celulares, o puede ser
acoplado químicamente a otras moléculas como anticuerpos que reconocen
específicamente cierto componente celular.
En el microscopio de epifluorescencia, la luz accede a la muestra desde la
parte superior y no la atraviesa,al mismo tiempo se colecta la luz emitida por la
muestra utilizando la misma lente. El microscopio cuenta con una lámpara de
mercurio o xenón que emite distintas longitudes de onda que atraviesan una
serie de lentes colectoras y un diafragma, hasta que alcanza un espejo que
desvía la luz en sentido vertical hacia la lente objetiva y atravesando ésta hacia
la muestra. Antes de llegar a lamuestra la luz atraviesa un filtro que selecciona
la longitud de onda de excitación dependiendo del fluorocromo que se esté
utilizando. La luz emitida por la muestra es captada por la lente objetiva y luego
de atravesar un sistema de filtros que impide el paso de la luz de excitación reflejada pero sí la emitida por la muestra, llega a la lente ocular (figura 6).

El microscopio nos sirvepara la observación de objetos próximos, pequeñísimos, indivisibles macroscópicamente. Nos da imágenes invertidas, o sea que el lado derecho del objeto amplificado aparece en la izquierda en la imagen óptica, y la cara superior de aquél se ve en la parte inferior de ésta. Goza de un enorme poder de amplificación, pudiendo sobrepujar a varios miles de diámetros. Fundamentalmente consiste su...