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I. EL PROBLEMA

Demostrar experimentalmente algunos métodos para la obtención de intermediarios metabólicos, particularmente los de la fermentación de la glucosa con las enzimas de la levadura yreconocerlos por medio de reacciones colorimétricas cualitativas.

II. INTRODUCCIÓN

La primera etapa de la fermentación de glucosa por las enzimas de la levadura es la producción de piruvato, esteprocedimiento se efectúa mediante una serie de reacciones que implican un número considerable de intermediarios, al cual se le denomina glicólisis anoxigénica o anaeróbica.

La reacción global sepodría considerar como la transferencia de dos pares de átomos de hidrógeno (2e- 2H+) de la glucosa al NAD+. Debido a que la coenzima sólo se encuentra en cantidades catalíticas, es necesarioreoxidarla para que esta transformación no se suspenda, y así, el NADH+ + H+ que se forma se reconvierte en NAD+ por el oxígeno molecular a través de la cadena respiratoria. Sin embargo, este proceso no serealiza cuando las condiciones son anaerobias y en este caso la reoxidación se efectúa cuando el piruvato se convierte en acetaldehído y posteriormente en etanol, según las siguientes reacciones

Elpiruvato forma acetaldehído y CO2 por la acción de la piruvato descarboxilasa la cual requiere del ión magnesio y de la tiamina pirofosfato (TPP). La enzima que cataliza la etapa final de lafermentación es la alcohol deshidrogenasa, el acetaldehído entonces se reduce a etanol reacción en la cual el NADH+ + H aporta el potencial de reducción.

Los metabolitos piruvato y acetaldehído, normalmentese encuentran presentes en muy bajas concentraciones, por lo tanto, para demostrar su existencia como intermediarios en las vía metabólicas, es necesario impedir que se transformen en otroscompuestos, situación que se logra ya sea bloqueando la enzima que cataliza la conversión del metabolito mediante el empleo de inhibidores, o cambiando las condiciones fisiológicas, por ejemplo, el valor de...