Transaminasa

DETERMINACION CUANTITATIVA DE TGO
OBJETIVO:
Cuantificar la presencia de TGO en suero humano.
INTRODUCCION:
Aspartato aminotransferasa (AST) o transaminasa glutámico oxalacética (TGO): seencuentra en el corazón, músculo esquelético, cerebro y riñón, además del hígado. Por ello, los niveles de AST podrán elevarse a parte de las hepatopatías, en el infarto al miocardio, insuficiencia cardiáca,lesiones musculares, las enfermedades del SNC y otras enfermedades extrahepáticas. A pesar de esta cierta inespecificidad, si las elevaciones muy elevadas podrá afirmarse con bastante seguridad queexiste lesión hepatocelular. Los valores > 500 UI/L son muy sugestivos de hepatitis vírica o tóxica aguda, aunque también pueden observarse en la insuficiencia cardiaca (hepatitis isquémica) e inclusoen las obstrucciones del colédoco por cálculos. La magnitud de la elevación no guarda relación con la gravedad de la hepatopatía.

En el hepatocito la AST o TGO es una enzima que se encuentra en elcitoplasma y las mitocondrias.

MATERIALES:
* Espectrofotómetro
* Baño María
* Pipetas serológicas
* Tubos de ensaye
SUBSTANCIAS:
* Buffer de TGO
* Enzimas TGO
* Suero* Cubetas

PROCEDIMIENTO:
1. Se prepara el reactivo con Buffer y los reactivos enzimáticos, 5 partes de Buffer y 1 parte de enzima (50 mL de buffer y 10 mL de enzima)
2. Lleve a ceroel espectrofotómetro a 340 nm con 1 mL de agua destilada
3. Por cada muestra y control, agregar 1.0 mL de reactivo de trabajo a la cubeta o tubo de prueba e incubar a 37° C por 3 minutos en elbaño maría.
4. Adicionar 0.10 mL de suero a cada celta respectivamente y agitar levemente
5. Leer y anotar la absorbancia al minuto 1. Continuar incubando a 37° C y anotar el cambio deabsorbancia a los 2 y 3 minutos. El cambio debe ser constante
6. Determinar el cambio de la absorbancia por minuto y multiplicar por el factor 1746 para obtener los resultados.

FORMULAS:

U/L= ∆...