Transcripción inversa

“Transcripción Inversa”

1. ¿Qué es la Transcripción Reversa?
El proceso mediante el cual el ARN sirve como molde para la síntesis de una molécula de ADN complementario recibe el nombre deTranscripción Reversa. Éste ocurre bajo la dirección de una enzima llamada transcriptasa inversa. La molécula intermediaria de ADN producida puede ser incorporada dentro del genoma de una célula huésped,de tal manera que se puedan producir copias de la molécula original de RNA. 1
La Reacción en Cadena de la Polimerasa, también conocida como PCR, es una técnica in vitro que permite replicar entrecientos de miles y millones de veces, en el transcurrir de pocas horas e in vitro, pequeñas cantidades de ADN. Uno de los aportes fundamentales de esta metodología a la investigación básica en biologíamolecular consiste en la rapidez y eficiencia mediante las cuales se realiza una tarea que antes requería largas y tediosas jornadas. 2
La PCR se trata de una técnica usada para crear un gran númerode copias de un segmento de ADN, que utiliza ciclos de desnaturalización, apareamiento con cebadores y extensión por una ADN polimerasa termo resistente.3
La reacción en cadena de la Polimerasa enTranscripción Reversa, por sus siglas en inglés RT-PCR, es una técnica de laboratorio variante de la PCR. Es comúnmente usada para generar una gran cantidad de copias de ADN en un proceso conocido comoamplificación y mediante el empleo de un equipo denominado termociclador.
En la RT-PCR, una hebra de ARN es retro transcrita a su ADN complementario, usando la misma enzima que en la RT común, esdecir, utilizando la transcriptasa inversa y el resultado se amplifica mediante el proceso de PCR tradicional. 4
2. ¿Cuál es el proceso general de la RT -PCR?
La RT-PCR utiliza un par de primers ,que son complementarios a una secuencia definida en cada una de las dos hebras del DNA. Estos primers son extendidos por la ADN Polimerasa y una copia de la cadena es producida después de cada...