Transformación Bacteriana

TRANSFORMACIÓN
RESULTADOS:
Equipo | Viables (LB) | Transformantes | Eficacia transformación | % Transformación |
1 | 1.48 x 107 | 30 | 1.875 x 10¹ | 0.0002 |
2 | 1.22 x 104 | 685 | 4.28 x 10²| 5.59 |
3 | 4 x 105 | 0 | 0 | 0 |

DISCUSIÓN:
Como podemos observar en la presente tabla, se ha conseguido el objetivo de este experimento, esto es, conseguir colonias transformadas con elplásmido p GL0 que han podido crecer sobre los medios marcadores de transfromación LB Ara y LB Amp Ara.
Dado que las colonias no transformantes no podrían crecer en estos medios se llevó a cabo uncontrol adicional del experimento sembrando colonias de la cepa E.coli HB101 sin transformar en ellos. Los resultados de esta siembra fueron satisfactorios porque las bacterias, al no ser portadorasdel plásmido, no presentaban resistencia a la Ampicilina y por lo tanto no se produjo crecimiento en ninguno de los medios.
En cuanto al doble marcaje de transformación se esperaba que las coloniascrecidas en estos medios (todas transformadas con el plásmido) presentaran diferencias al ser expuestas a la luz UV por la activación del operón Arabinosa en aquellas colonias que dispusieran de estecompuesto en el medio. Este hecho se comprobó al observar las colonias transformantes crecidas en los dos medios a la luz UV , ya que las crecidas en el medio con Arabinosa presentaban fluorescenciapor la activación del operón y la consiguiente expresión del gen GFP, mientras que las del medio LB Amp no la presentaban.
Por último cabe discutir la diversidad de resultados obtenidos entre losequipos, ya que la eficacia de transformación varía entre los diferentes equipos de trabajo, dándose el mayor % con un valor del 5.59%. Ha de destacarse que mientras que los equipos 1 y 2 presentancolonias transformantes, el equipo 3 tuvo una eficacia de transformación nula. Tras analizar este hecho se concluye que el error no pudo darse ni en el tipo de cepa utilizado, ni en los medios ni en el...