Transformaci N Gen Tica Por Agrobacterium Rhizogenes

SISTEMAS DE
TRANSFORMACIÓN
GENÉTICA

Transformación

 Se

refiere al proceso de alterar una
célula de forma que adquiera y
exprese material genético del
ambiente que la rodea.
Después de la inserción de un ADN
extraño en un vector , el siguiente
paso
es
introducir
el
ADN
recombinante, en una célula huésped
adecuada .
El proceso de introducción de ADN
en las células vivas se denominatransformación.

electroporación
Para aumentar la eficiencia de la captación de
ADN , electroporación es frecuentemente
utilizado .
El procedimiento se emplea en la levadura ,
hongos y células de plantas , y menos
frecuentemente en los sistemas bacterianos y
los animales.
Pulso eléctrico crea poros acuosos por donde
entra el DNA.

Transformación Química


• Utiliza CaCl2 para facilitar la unión del
ADN alas paredes de las células
ADN extraño se puede introducir fácilmente en
células bacterianas si las células han sido pre
tratadas con CaCl2 o una combinación con
otras
sales.

MÉTODOS INDIRECTOS


Sistema Agrobacterium



Debido a la capacidad y a la
eficiencia de este género en
infectar diversos organismos
vegetales surgió la idea de
utilizar Agrobacterium como
mediador para la introducción
degenes de interés en plantas
(Hellens & Mullineaux, 2000).



La infección por Agrobacterium en una planta es el resultado de un
proceso de evolución altamente especializado: la transferencia de
genes desde bacterias hacia plantas.



región T-DNA



Y se encuentra en el plásmido residente de la bacteria llamado :



plásmido Ti



Para que se dé una transferencia efectiva de esta región esnecesaria la expresión de los “genes Vir” contenidos en la región Vir
(región de virulencia), la cual, se encuentra en el plásmido TI



Este proceso inicia cuando se producen heridas en las células de la planta, se liberan al
medio compuestos fenólicos y monosacáridos, que son reconocidos por Agrobacterium,
induciendo una unión entre la bacteria y las células vegetales.

Transformacióngenética y
biolística

Transformación genética
 transformación es

la alteración
genética de una bacteria resultante de la
absorción directa, incorporación y
expresión del material genético.

  La

transformación ocurre de forma
natural en algunas especies de bacterias,
aunque también se puede efectuar por
medios artificiales.

 Ejemplo

básico de transformación genética es la
transformación genéticade plantas.

  Consiste

en la transferencia de material genético proveniente
del mismo u otro organismo. 

Métodos de transformación
genética
Agrobacterium

rhizogenes y tumefaciens.
 Transformación química con cloruro de
calcio.
Biolística.

Construcción de un vector
En

las técnicas de transformación es
necesario disponer del gen de interés
dentro de un vector (vehículo)
apropiado paraser transferido al
tejido que se quiere transformar. Este
vector es generalmente un plásmido al
que se le inserta el gen de interés.

Método de biobalistica
   Introducción

directa de DNA a células intactas, tejidos y
órganos a través del disparo de micro proyectiles con una
pistola de genes.

 Consiste

en la entrega de micro proyectiles, usualmente
de oro, recubierto con DNA y propulsarse enlas células
por la aceleración. 

 Estas

bolas se retrasarán progresivamente
cruzando las distintas capas celulares.  Algunas
de las células alcanzadas van entonces a integrar
espontáneamente los genes en su genoma. 

Transformación química con
cloruro de calcio.

A foreign DNA can be easily introduced into bacterial
cells if the cells have been pretreated with CaCl2 or a
combination withother salts. The treated cells are
called competent cells that are able to take up DNA
readily. With other cell types, transformation
generally requires additional treatments. Yeast,
fungal, and plant cells contain cell walls in some
cases need to be digested to produce protoplasts (cell
minus cell wall) before DNA can be picked up.

A common method for introducing a foreign DNA into
mammalian...