Transformacion De Las Palabras

DIVISIÓN
QUÍMICA ÁREA BIOTECNOLOGÍA

“CLONACIÓN DE CRPB1 A PARTIR DE LA TÉCNICA DE PCR”

TESIS
PARA OBTENER EL TÍTULO DE:

TÉCNICO SUPERIOR UNIVERSITARIO

PRESENTA:

ÁLVAREZ TOPETE ESMERALDA

ASESORES ACADEMICOS:

M. en C. Jesús Alarcón Bonilla
M. en C. Ma. Del Socorro

ASESORES INSTITUCIONALES:

Dr. Marco Antonio Meraz Ríos
M. en C. Ma. Del Pilar Figueroa C.

I.INTRODUCCIÓN

El cáncer es una de las principales causas de muerte en todo el mundo en 2008 causo 7,6 millones de defunciones (aproximadamente un 13%del total), los tipos de cáncer mas frecuentes en la población mexicana son de pulmón, estomago mama y cáncer cérvicouterino.

El cáncer cérvicouterino es un tipo de cáncer en mujeres, y consiste en una enfermedad en la cual se encuentra célulascancerosas malignas en los tejidos de cuello uterino. Este tipo de cáncer es la primera causa de muerte en mujeres de 25 a 64 años de edad y el tercero en mortalidad relacionado con los tumores malignos en la población en general.

En la actualidad se han realizado infinidad de estudios relacionados a esta enfermedad, y aunque ya es un cáncer muy tratable no deja de cobrar la vida de miles de mujerestanto en México como en el mundo.

Estudios recientes nos hablan del retinol también llamada vitamina A

II. OBJETIVOS

3.1 OBJETIVOS GENERALES

* Clonar gen de la proteína CRPB1

3.2 OBJETIVOS PARTICULARES

* Amplificación del ADN por la técnica de PCR



III. MARCO TEORICO

4.3 Retinol y CRPB-1
El retinol también conocido como Vitamina Atiene gran importancia dentro de los proceso biológicos del ser humano, por ejemplo el retinol es esencial para la visión, ya que contribuye a mejorar la visión nocturna así como prevenir ciertas alteraciones visuales como las cataratas, glaucoma y ceguera. Además de ayudar al mantenimiento y desarrollo del tejido epitelial, contribuye con las funciones inmunitarias y con las reproductivas, asimismodisminuye la gravedad de las enfermedades en la infancia al mejorar o reforzar el sistema inmunológico.
Otra de las funciones del retinol protege al ADN de su acción mutagena, es decir evitando que exista alteración en la estructura del ADN evitando la aparición de enfermedades tales como el cáncer.
La proteína CRPB-1 esta codificada por el gen RPB 1, el cual participa en la interacción entre elretinol y el medio enzimático, evitando la oxidación e isomerización.
4.4 Clonación molecular
La clonación molecular es el procedimiento para producir en el laboratorio muchas copias del mismo ADN.

4.5.1 Pasos generales del proceso de la clonación natural
1. extraer el ADN de la célula
2. con el empleo de enzimas de restricción se fragmentara el ADN que se extrajo3. una vez que tenemos fragmentado nuestro ADN se realiza una genoteca la cual contenga la información de los fragmentos derivados del genoma
4. una vez que tenemos la genoteca empleamos un vector que permita la síntesis de la proteína de interés
5. aislamos el fragmento que se desea clonar de entre todos los segmentos
6. Sintetizamos la Sonda, una vez que está sintetizada nuestrasonda podremos utilizar para localizar el clon que tiene nuestro gen
7. realizamos el denominado “blooting” o wester blot el cual nos servirá para la identificación de proteínas
8. añadimos la sonda sintetizada marcada radioactivamente, para así detectar las colonias que contengan el fragmento de ADN.

4.5.2 Amplificación de un gen a partir de la técnica de PCR
La reacción encadena de la polimerasa (PCR), es el proceso de replicación en el cual a partir de una cadena de DNA se sintetiza o se forma otra cadena nueva de DNA. En la PCR la enzima que se emplea es una Taq polimerasa, la cual es proveniente del organismo Termus aquaticus el cual habita en las fumarolas de océanos en temperaturas mayores a los 100ºC la cual maneja en cuanto a la polimerasa una máxima...