transformacion

TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO: CONJUGACIÓN Y TRANSFORMACIÓN.
I. Introducción.
Una bacteria sólo puede adquirir material génico a partir de otra bacteria que lo contenga, ya sea por transmisión vertical (es decir, de célula progenitora a célula hija) o por cualquiera de los tres mecanismos conocidos de transferencia horizontal de material genético. Estos son: la, la transducción, laconjugación y la transformación. [1]
En la transducción, un virus bacteriano accidentalmente toma DNA del cromosoma o de una plásmido de la bacteria a la que ha infectado y lo inyecta a otras bacterias.
La conjugación bacteriana es un proceso de transferencia de material genético en el que la información genética de un plásmido es transferido a otra célula.
Además del cromosoma, muchas célulasprocariotas contienen otros elementos genéticos, sobretodo plásmidos. Los plásmidos son moléculas de DNA extracromosómico, covalentemente cerrados y generalmente, de tamaño pequeño que se encuentran en muchas especies bacterianas y que se pueden replicar de manera independiente del DNA cromosómico. A diferencia de éste, los plásmidos no son necesarios para la viabilidad de la célula, pero puedencontener genes que contribuyen a la sobrevivencia en condiciones especiales, como los que confieren resistencia a antibióticos o a metales. [1]
La conjugación a diferencia de la transformación tiene como condición esencial el contacto celular. A la célula que aporta el material genético se le llama donadora y a la que lo recibe, receptora. No todos los plásmidos pueden transmitirse por conjugación, esdecir ser conjugativos, solamente aquellos que poseen un grupo de genes denominados genes tra. Dentro de este grupo de plásmidos se encuentra el factor de fertilidad o plásmido F de E.coli. El plásmido F contiene más de 40 genes tra, la mayoría de los cuales son necesarios para la construcción de un organelo llamado pili sexual, el cual es necesario para promover el contacto entre las célular.[1]

El plásmido F confiere a la célula bacteriana la capacidad de conjugarse con otra célula que no lo posea.
Transformación. El DNA liberado de una célula bacteriana entra a otra célula, generalmente de la misma especie.
La transformación puede producirse naturalmente cuando la bacteria muerta se degrada y libera fragmentos de DNA al entorno, o bien, puede ser inducida artificialmente. Lamayoría de las bacterias son impermeables a la entrada de DNA exógeno, sin embargo se cuenta con métodos físicos y químicos que facilitan la entrada de DNA en la bacteria (choque térmico, electroporación). Las células que han recibido un tratamiento apropiado para llevar a cabo la introducción de material genético se denominan células competentes. Así mismo estás células al recibir el materialgenético a través de la transformación y por ende expresar el marcador genético seleccionado se denominan transformantes. Este fenómeno es de vital importancia en biología molecular, ya que con este proceso es posible la introducción de plásmidos sintéticos o naturales.
Para ser utilizado como vector de clonación, un plásmido debe poseer al menos tres características:
1) Tener replicación autónoma eindependiente del genoma hospedero.
2) Tener un sitio de clonación múltiple que permita la apertura del DNA con enzimas de restricción.
3) Poseer marcadores genéticos seleccionables que permitan aislar a las células hospederas que contengan el vector, generalmente resistencia a antibiótico.
En esta práctica se comprobó la conjugación bacteriana mediante la transferencia de un marcador genético:la resistencia a la kanamicina. El marcador genético de selección que se utilizó para la cepa receptora fue la resistencia a la estreptomicina.
Cepa receptora: E. coli JM145StrR
Cepa donadora: E.coli W3110/F´KMTn3.

Como segunda parte se realizó la transformación de células de E.coli mediante la técnica de choque térmico, utilizándose como indicador de la transformación la resistencia a...