Transformación Del Adn
Páginas: 8 (1912 palabras)
Publicado: 11 de enero de 2013
U.T.8 TRANSFORMACIÓN DEL ADN
Descubrimiento de la transformación
En 1928 F. Griffith, trabajó con dos cepas de neumococos productoras de la neumonía humana:
Bacterias no capsuladas formando colonias rugosas R (no virulenta: no mueren los ratones). Los que presentan un aspecto de superficie áspera (rugosa) R, eran inofensivos cuando se inyectaban en ratones.
Bacterias capsuladasformando colonias lisas S (virulenta: mueren los ratones). Una inyección de neumococos del tipo S liso, mata a un ratón en 24 horas. Después de un cultivo prolongado en un medio artificial, algunas células pierden la capacidad de formar la cápsula y la superficie de las colonias muestran un aspecto rugoso y áspero R. Con la pérdida de esta cápsula, la bacteria también pierde su virulencia.Griffith observó que si inyectaba a los ratones con neumococos de tipo R (no virulentos) a las 24 horas seguían vivos mientras que si los inyectaba con neumococos S (virulentos) a las 24 horas los ratones morían. Entonces decidió calentar los neumococos S (virulentos) para destruirlos y posteriormente inyectarlos a los ratones, encontrando que los ratones seguían vivos después de 24 horas. Porconsiguiente el calor, destruía el poder infectivo de los neumococos S. Por último, inyectó a los ratones una mezcla de neumococos R vivos (no virulentos) y de S (virulentos) previamente muertos por calor, encontrando que los ratones morían a las 24 horas y extrayendo de su sangre neumococos S vivos.
Conclusiones de Griffith:
Puesto que los neumococos R (no virulentos) nunca mutan a S(virulentos)
La existencia de una sustancia presente en los extractos de neumococos S muertos por calor que es capaz de transformar a los neumococos R vivos en S vivos. Dicha sustancia fue denominada por Griffith el proceso Transformación bacteriana.
En 1944, Oswald Avery, C. MacLeod y McCarty, se propuso identificar la molécula responsable de la transformación bacteriana, descubierta por Griffith.Para esto aislaron las diferentes clases de moléculas de la cepa S (proteínas, lípidos, hidratos de carbono, ARN y ADN) y analizaron el efecto de cada una sobre el fenotipo de las células de la cepa R, al agregarlas al medio de cultivo. El resultado fue que solo una molécula, el ADN, produjo la transformación bacteriana.
Transformación bacteriana en el laboratorio
La transformacióngenética ocurre cuando una célula incorpora dentro de ella y expresa un nuevo pedazo de material genético ( DNA). Esta nueva información genética muchas veces provee al organismo de una nueva característica que se puede identificar luego de ocurrida la transformación.
Transformación genética significa cambio causado por genes e involucra la inserción de uno o más genes en el organismo en orden decambiar las características del organismo.
Para poder realizar dicha transformación, es necesario poseer un ADN donante, que se encuentra en células en estado competente (capacidad de las células para incorporar ADN exógeno). Existen dos formas de obtener células competentes:
Natural
Artificial (no está codificada en los genes celulares, sino que es inducida)
Antes de emplear las célulascompetente preparadas, es preciso determinar la eficacia de las mismas. Eficacia = ( Nºufc . d . Voriginal / Vinóculo) / µd ADN empleado |
Introducción de las moléculas de ADN recombinante en una célula hospedadora apropiada
El objetivo es conseguir que los vectores recombinantes se multipliquen en células hospedadoras adecuadas. Estos vectores se introducen mediante las siguientestécnicas:
Transformación química | Electroporación |
Tienen como finalidad aumentar la permeabilidad de las membranas al ADN. |
Se refiere al proceso de alterar una célula de forma que adquiera y exprese material genético del ambiente que la rodea, basándose en el choque térmico o cloruro cálcico | Expone a las membranas a campos eléctricos de gran voltaje. Además de...
Descubrimiento de la transformación
En 1928 F. Griffith, trabajó con dos cepas de neumococos productoras de la neumonía humana:
Bacterias no capsuladas formando colonias rugosas R (no virulenta: no mueren los ratones). Los que presentan un aspecto de superficie áspera (rugosa) R, eran inofensivos cuando se inyectaban en ratones.
Bacterias capsuladasformando colonias lisas S (virulenta: mueren los ratones). Una inyección de neumococos del tipo S liso, mata a un ratón en 24 horas. Después de un cultivo prolongado en un medio artificial, algunas células pierden la capacidad de formar la cápsula y la superficie de las colonias muestran un aspecto rugoso y áspero R. Con la pérdida de esta cápsula, la bacteria también pierde su virulencia.Griffith observó que si inyectaba a los ratones con neumococos de tipo R (no virulentos) a las 24 horas seguían vivos mientras que si los inyectaba con neumococos S (virulentos) a las 24 horas los ratones morían. Entonces decidió calentar los neumococos S (virulentos) para destruirlos y posteriormente inyectarlos a los ratones, encontrando que los ratones seguían vivos después de 24 horas. Porconsiguiente el calor, destruía el poder infectivo de los neumococos S. Por último, inyectó a los ratones una mezcla de neumococos R vivos (no virulentos) y de S (virulentos) previamente muertos por calor, encontrando que los ratones morían a las 24 horas y extrayendo de su sangre neumococos S vivos.
Conclusiones de Griffith:
Puesto que los neumococos R (no virulentos) nunca mutan a S(virulentos)
La existencia de una sustancia presente en los extractos de neumococos S muertos por calor que es capaz de transformar a los neumococos R vivos en S vivos. Dicha sustancia fue denominada por Griffith el proceso Transformación bacteriana.
En 1944, Oswald Avery, C. MacLeod y McCarty, se propuso identificar la molécula responsable de la transformación bacteriana, descubierta por Griffith.Para esto aislaron las diferentes clases de moléculas de la cepa S (proteínas, lípidos, hidratos de carbono, ARN y ADN) y analizaron el efecto de cada una sobre el fenotipo de las células de la cepa R, al agregarlas al medio de cultivo. El resultado fue que solo una molécula, el ADN, produjo la transformación bacteriana.
Transformación bacteriana en el laboratorio
La transformacióngenética ocurre cuando una célula incorpora dentro de ella y expresa un nuevo pedazo de material genético ( DNA). Esta nueva información genética muchas veces provee al organismo de una nueva característica que se puede identificar luego de ocurrida la transformación.
Transformación genética significa cambio causado por genes e involucra la inserción de uno o más genes en el organismo en orden decambiar las características del organismo.
Para poder realizar dicha transformación, es necesario poseer un ADN donante, que se encuentra en células en estado competente (capacidad de las células para incorporar ADN exógeno). Existen dos formas de obtener células competentes:
Natural
Artificial (no está codificada en los genes celulares, sino que es inducida)
Antes de emplear las célulascompetente preparadas, es preciso determinar la eficacia de las mismas. Eficacia = ( Nºufc . d . Voriginal / Vinóculo) / µd ADN empleado |
Introducción de las moléculas de ADN recombinante en una célula hospedadora apropiada
El objetivo es conseguir que los vectores recombinantes se multipliquen en células hospedadoras adecuadas. Estos vectores se introducen mediante las siguientestécnicas:
Transformación química | Electroporación |
Tienen como finalidad aumentar la permeabilidad de las membranas al ADN. |
Se refiere al proceso de alterar una célula de forma que adquiera y exprese material genético del ambiente que la rodea, basándose en el choque térmico o cloruro cálcico | Expone a las membranas a campos eléctricos de gran voltaje. Además de...
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