Transgenicos

INTRODUCCIÓN

Desde el experimento de Broglie et al. (1984), en el cual un callo de petunia expresó un gen de guisante y se demostró que los genes introducidos pueden expresarse en células transformadas y responder a los mismos estímulos ambientales que la planta completa, ha pasado mucha agua bajo el puente. Hoy la invención de variedades, genéticamente modificadas, o plantastransgénicas, es cosa de todos los días (Mohanty, et al., 1999).
La transformación vegetal se puede definir como el proceso de cambiar el fenotipo de un organismo a través de la introducción de ADN extraño al genoma. En plantas esta técnica se ha refinado y constantemente se perfeccionan las técnicas para permitir trabajar en distintos grupos y lograr una transformación más estable. Las plantastransgénicas se generan cuando el tejido vegetal transformado puede regenerarse y producir plantas conteniendo el ADN extraño. Es posible hoy introducir en una planta genes provenientes no sólo de otras plantas, sino de cualquier otro organismo, virus, bacteria, animal o levadura.
Existen dos tipos de técnicas básicas. La primera introduce el ADN a las células vegetales usando Agrobacterium, unabacteria que infecta los tejidos vegetales, modifica el genoma de estas y provoca crecimientos tumorosos. La otra técnica involucra la introducción directa de ADN desnudo usando distintos métodos, como el bombardeo con partículas, la electroporación o mediada por glicol polietilénico (PEG).
En el ámbito comercial, la inserción de genes específicos en cultivares de uso agrícola permite laobtención de fenotipos deseables en mucho menos tiempo que con los métodos tradicionales (Auberson, 1998).
La utilización a gran escala de plantas transgénicas con fines comerciales conlleva potenciales peligros a la salud y el ambiente que han provocado fuertes cuestionamientos respecto a la seguridad de este método al usarse en plantas para el consumo humano. (Haslberger, 2000).

MATERIALESGen de interes o inserto.- Que en este caso es el gen NIF fijador de Nirtrogeno.
Vector.- Utilizaremos el Plasmido Ti de la A. Tumefaciens.
Planta para el transgen.
Gen reportero. Este gen por disposiciones utilizaremos la luciferina.

MÉTODOS PARA LA TRANSFORMACIÓN VEGETAL

Existen diferentes metologias de elaboración de una planta transgenica que en el presente trabajo haremos ladescripción de 2 de ellas.

Transformación mediada por Agrobacterium

Hoy en día los vectores de Agrobacterium usados para la transformación de plantas son del tipo denominado vectores binarios, debido a que, a diferencia de los vectores cointegrados, las secuencias a ser transferidas al genoma de la planta están en un plásmido aparte de los genes de la región vir . El uso de los vectorescointegrados está limitado por las posibles secuencias de recombinación para la cointegración de las secuencias deseadas en el plásmido Ti (Bevan, 1984). El plásmido con los genes vir se denomina plásmido “asistente”. Con este tipo de vectores, usando plásmidos asistentes con genes adicionales para virG y virE pueden introducirse hasta 150 kb de DNA al genoma nuclear de la planta. La creación deplásmidos para vectores binarios se puede realizar usando procedimientos estándar y clonándolos en E. coli como vector intermedio, usando genes de resistencia a antibióticos para su selección.
Existen diversos métodos para la transformación con Agrobacterium, dependiendo de la especie tratada y su resistencia a la infección y al cultivo in vitro. Se considera más eficiente, a la hora de desarrollaruna metodología para una especie de planta, establecer primero las condiciones para la transferencia de genes y luego trabajar en la regeneración de las células transformadas.
La metodología usada inicialmente por el laboratorio de Monsanto regeneraba las plantas transformadas a partir de protoplastos. Sin embargo este método, además de ser complicado, no se puede utilizar en todas las...