Trasformación de células vegetales obtención de plantas transgénicas

Trasformación de células vegetales Obtención de plantas transgénicas

Diana Carranza Domínguez.

ÍNDICE:
1.- INTRODUCCIÓN 2.-Agrobacterium COMO TRANSFORMACIÓN VEGETAL: 2.1.- Agrobacterium tumefaciens
2.1.1.- TRANSFORMACIÓN DE LA CÉLULA VEGETAL CON EL PLÁSMIDO TI DE A. tumefaciens
- GENES op - GENES onc - ORIGEN DE REPLICACIÓN - GENES vir - BORDES DERECHO E IZQUIERDO

MÉTODO

DE2.1.2- Ingeniería genética de plantas usando T-DNA
- LIMITACIONES DE LOS PLÁSMIDOS TI - SISTEMAS DE VECTORES DERIVADOS DEL PLÁSMIDO TI: Sistemas de vector binario Sistemas de vector cointegrado

2.2.- Agrobacterium rhizogenes

3.- VECTORES VIRALES:
3.1- VIRUS DNA:
- Caulimovirus - Geminivirus

3.2.- VIRUS RNA

4.-VECTORES TRANSPOSONES

5.- TÉCNICAS DE TRANSFERENCIA GÉNICA DIRECTA:5.1.- TRANSFETERENCIA DE DNA A PROTOPLASTOS 5.2.- BOMBARDEO CON MICROPROYECTILES 5.3.- MICROINYECCIÓN 5.4.- MACROINYECCIÓN 5.5.- ELECTROPORACIÓN 5.6.- ULTRASONIDOS 5.7.-TRANSFORMACIÓN GÉNICA MEDIANTE LÁSER 5.8.- TRANSFORMACIÓN MEDIADA POR POLEN 5.9.- TRANSFERENCIA GÉNICA POR IMBIBICIÓN

6.- GENES MARCADORES
6.1.- Marcadores que confieren viabilidad o letalidad bajo condiciones de selección
6.1.1.-Marcadores de resistencia a herbicidas o antibióticos 6.1.2.- Marcadores auxotróficos 6.1.3.- Marcadores letales

6.2.- MARCADORES VISIBLES:
6.2.1.- Marcadores histológicos. 6.2.2- Marcadores morfológicos 6.2.3.- Marcadores de pigmentación

1.- INTRODUCCIÓN
Se ha realizado un esfuerzo considerable para el desarrollo de variedades de plantas con una elevada producción o un valor nutricionalrealzado. Aunque las principales investigaciones se han dedicado a la mejora de los tres principales cereales –maíz, trigo y arroz– se han establecido también programas de mejora para otras plantas comestibles y especies de horticultura. La tecnología del DNA recombinante, ampliamente utilizada con sistemas microbianos, es también una importante herramienta para la manipulación genética directade plantas, Existe un número de métodos de transferencia de DNA y vectores de expresión efectivos que se ocupan de un amplio rango de células vegetales. Además, las células vegetales son totipotentes –se puede regenerar una planta entera a partir de una sola célula– así que se pueden producir plantas fértiles que porten gen(es) foráneo(s) en todas sus células (i.e., plantas transgénicas) a partirde células genéticamente modificadas. Si la planta transgénica florece y produce semillas viables, el carácter deseado pasará a sucesivas generaciones. Existen tres principales motivaciones para el desarrollo de plantas transgénicas. En primer lugar, la adición del gen o genes generalmente mejora el valor agricultor, horticultor u ornamental de una planta. Segundo, las plantas transgénicas puedenactuar como biorreactores para la producción barata de proteínas o metabolitos económicamente relevantes. Y por último, la transgénesis de plantas proporciona medios eficaces para el estudio de la acción de genes durante el desarrollo y otros procesos biológicos de las plantas. Algunos de los caracteres genéticamente determinados que pueden introducirse en plantas mediante un único gen o,potencialmente, mediante un pequeño cluster de genes, incluyen actividad insecticida, protección frente a la infección viral, resistencia a herbicidas, protección contra bacterias y hongos patógenos, reducción de la senescencia, tolerancia a estrés ambiental, pigmentación alterada de las flores, mejora de la calidad nutricional de las semillas... Además, las plantas transgénicas pueden producir una ampliavariedad de compuestos útiles, incluyendo agentes terapéuticos, polímeros, y herramientas diagnósticas como fragmentos de anticuerpos. De forma alternativa, pueden diseñarse para la síntesis de determinantes antigénicos virales que, tras la ingestión, pueden usarse como vacunas comestibles. Hasta la fecha, unas 140 especies vegetales diferentes han sido genéticamente transformadas, incluidas...