Tratamiento De La Muestra

a- solanina y un chaconina son las toxinas de la patata asociada con la intoxicación alimentaria . Estos alcaloides se derivan de la solanidina compuesto e incluyen una cadena lateral de carbohidrato ; la cadena lateral de un - solanina se compone de glucosa, galactosa y ramnosa, y la de un - chaconina se compone de glucosa y dos moléculas de ramnosa ( Friedman y McDonald, 1999 ; Ripperger ,1998 ) . La ligera diferencia en los azúcares del triosa ha sido considerado para hacer que los diferentes efectos citotóxicos entre a- solanina y a- chaconina ( Friedman, 2006 ; Waissenberg , Levy, Svoboda, y Ishaaya , 1998 ) .

Los posibles efectos tóxicos de un-solanina y A-chaconina tienensido estudiado por los ensayos con animales (Alozie, Sharma, y ​​Salunkhe, 1979; Dalvi, 1985;. Langkilde etal, 2008; Nishie, Gumbmann, y Keyl,1971; Norred, Nishie, y Osman, 1976; Sharma, Taylor, y Bourcier, 1983) y la investigación clínica (Harris & Whittaker, 1962; Harvey, McMillan, Morgan, y Chan, 1985; Harvey, Morris, McMillan, y Marks, 1985; Patil, Sharma, Salunkhe, y Salunkhe, 1972; Pfuhl, 1899), pero el mecanismo de la acción letal de estos alcaloides es poco ed clarifica. En pruebas in vitrodemostraron que estos alcaloides inhiben la acetilcolinesterasa humana (McGehee et al., 2000) y el transporte de calcio (Michalska, Nagel, Swiniarski, y Żydowo, 1985) en el intervalo de concentración milimolar. Un estudio sugirió que a-solanina causó la interacción con las membranas mitocondriales para abrir los canales de potasio de las mitocondrias y para activar células el daño y la apoptosis (Gao,Wang, y Ji, 2006). Otros estudios también proponen el mecanismo de la membrana celular Interrumpir por la destrucción determinista ción de las membranas (Roddick, Rijnenberg, y Osman, 1988; Roddick y Rijnenberg, 1987) y la inhibición del transporte de iones a través de membranas (Blankemeyer, Atherton, y Friedman, 1995; Blankemeyer, Stringer, Rayburn, Bantle, y Friedman, 1992;. Toyoda et al,1991).

Aunque se observaron los efectos citotóxicos anteriores en el rango millmolar, hemos propuesto la posibilidad de acción letal debido a la destrucción de las células nerviosas inducidas por estos alcaloides en el rango micromolar. Este estudio demuestra que a-solanina y un chaconina en el rango micromolar dañado el plasma bro brana de las células de glioma de rata C6 para causar la liberaciónde LDH (lactato deshidrogenasa) de las células y la disminución de NAD (P) H produc- tividad y NAD (P) H: quinona reductasa actividad mediante el uso de tres pruebas de viabilidad celular diferentes. Los diferentes eventos citotóxicos anteriores eran observado como un efecto sinérgico entre a-solanina y a-chaconina. Después de la rápida daño de la viabilidad celular por estos alcalina loids, seobservó poca recuperación de las células. En este trabajo se discuten los efectos citotóxicos rápidas de estos alcaloides en las células gli- oma C6 de rata que interactúan íntimamente con las neuronas en todo el espacio extracelular estrecha y juegan un papel importante en la regulación de K + extracelular niveles, el metabolismo de CO2 y la captación de neurotransmisores (Landis, 1994).

material ymétodos

2.1. Organismos y condiciones de crecimiento

células de glioma C6 de rata se cultivaron en modi fi cada de Dulbecco medio de Eagle suplementado con 10% de suero bovino fetal (Medio A). Las células fueron cultivadas en un tejido Falcon matraz en una atmósfera fi ed HUMIDI de 95% de aire y 5% de CO2 a 37 C. crecimiento exponencial se tripsinizaron células de valores, y se diluyó ladensidad celular a aproximadamente 100.000 células / ml con el medio de cultivo anterior. Cien microlitros de la suspensión de células resultante se añadieron a cada pocillo de una placa de 96 pocillos, y las células se vada culti- durante 2 días. Después del cultivo, cada pocillo de la placa se lavó con PBS, y las células en cada pocillo se incubaron con a-solanina y a-chaconina durante el periodo...