Trigliceridos

TG Color

C

GPO/PAP AA
Método enzimático para la determinación de triglicéridos en suero o plasma

SIGNIFICACION CLINICA
Los triglicéridos son lípidos absorbidos en la dieta y también
producidos en forma endógena a partir de los carbohidratos.
Su medición es importante en el diagnóstico y manejo de las
hiperlipidemias. Estas enfermedades pueden tener origen genético o ser secundariasa otras tales como nefrosis, diabetes mellitus y disfunciones endócrinas. El aumento de triglicéridos se ha identificado como un factor de riesgo en enfermedades ateroscleróticas.
FUNDAMENTOS DEL METODO
El esquema de reacción es el siguiente:
lipoprotein lipasa
triglicéridos
> glicerol + ácidos grasos
glicerol kinasa
glicerol + ATP
> glicerol-1-P + ADP
GPO
> H2O2 +dihidroxiacetonafosfato
glicerol-1-fosfato + O2
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol

POD

> quinonimina roja

REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: viales conteniendo lipoprotein lipasa, glicerol
kinasa (GK), glicerol fosfato oxidasa (GPO), peroxidasa
(POD), adenosina trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF).
B. Reactivo B: solución de buffer Good conteniendo clorofenol,
pH 7,5.
S. Standard: solución de glicerol2,26 mmol/l (equivale a 2 g/l
de trioleína).
Concentraciones finales
Good ........................................................ 50 mmol/l; pH 7,5
clorofenol ............................................................... 2 mmol/l
lipoprotein lipasa .................................................... ≥ 800 U/l
GK ......................................................................... ≥ 500U/l
GPO .................................................................... ≥ 1500 U/l
POD ...................................................................... ≥ 900 U/l
ATP ....................................................................... 2 mmol/l
4-AF ................................................................... 0,4 mmol/l
REACTIVOS NO PROVISTOS
Calibrador A plus de Wienerlab. cuando se emplea la técnica automática.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Standard: listo para usar.
Reactivo de Trabajo:
- 5/10 x 20 ml: agregar 20 ml de Reactivo B a un vial de Reactivo
A. Mezclar hasta disolución completa. Homogeneizar y fechar.

- 4 x 50 ml: reconstituir el contenido de un vial de Reactivo A
con una porción de Reactivo B y luego transferir al frasco de
Reactivo Benjuagando varias veces. Homogeneizar y fechar.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son establesen refrigerador (2-10oC)
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
Reactivo de Trabajo: es estable 30 días en refrigerador (2-10oC).
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
El Reactivo de Trabajo puede presentar una coloración rosada que no afecta su funcionamiento.
Lecturas del Blanco superiores a 0,160D.O. o lecturas del
Standard anormalmente bajas, son indicios de deterioro del
Reactivo. En tal caso, desechar.
MUESTRA
Suero o plasma
a) Recolección: previo ayuno de 12 a 14 horas, obtener suero o plasma. Separar de los glóbulos rojos dentro de las 2
horas de extracción.
b) Aditivos: en caso de emplear plasma, se recomienda el
uso de Anticoagulante W o heparina para su obtención.
c)Sustancias interferentes conocidas: los sueros con hemólisis intensa o marcadamente ictéricos producen resultados erróneos, por lo que no deben ser usados.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: los
triglicéridos en suero son estables 3 días en refrigerador (210oC). No congelar.
MATERIAL...