Turbidimetria
DIVISIÓN ACADÉMICA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
ASIGNATURA:
BACTERIAS Y MICOIDES
NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
TURBIDIMETRIA
INTEGRANTES:
BAEZA LÁZARO YASMIN PATRICIA
ESTRADA PÉREZ MAYRA ALEJANDRA
SÁNCHEZ HERRERA AXEL YAIR
SÁNCHEZ LÓPEZ PABLO GUADALUPE
SANTIAGO ALONSO OSMAR
FECHA DE LA PRÁCTICA: De: Martes 25 a Jueves 27 de Octubrede 2011
FECHA DE ENTREGA DEL REPORTE: Jueves 10 de noviembre de 2011
* INTRODUCCION
Los métodos directos de cuantificación de microorganismos permiten establecer la
población total de microorganismos existentes, tienen la ventaja de ser rápidos aunque no es posible diferenciar a las células vivas de las muertas. Entre estos
métodos tenemos la turbidimetría y el conteo de células.Con la cuantificación de microorganismos a través del tiempo es posible el
representar gráficamente el crecimiento microbiano. La curva presenta distintas
fases:
• Fase de latencia ó lag: período de adaptación de un microorganismo a un nuevo medio de cultivo.
• Fase exponencial o logarítmica: aumento regular de la población que se
duplica a intervalos regulares de tiempo (td).
• Faseestacionaria: cese del crecimiento por agotamiento de nutrientes, por
acumulación de productos tóxicos, etc.
• Fase de declinación o muerte: el número de células que mueren es mayor
que el número de células que se dividen.
2) Métodos turbidimétricos (ópticos). Son muy usados en la práctica cotidiana del laboratorio. La base común de
estos métodos consiste en la medición de la cantidad de luzdispersada o transmitida a través de un cultivo bacteriano. Recordemos aquí que las suspensiones bacterianas dispersan la luz, al igual que cualquier partícula pequeña suspendida en agua (efecto Tyndall). La dispersión de la luz es, dentro de ciertos límites, proporcional a la masa del cultivo.
TURBIDIMETRIA
En una suspensión microbiana la cantidad de microorganismos esta relacionada con laturbiedad o densidad óptica de la misma, e inversamente relacionada con la cantidad de luz que pasa por la misma.
De este modo, se puede precisar con bastante exactitud el número de microorganismos presentes en una suspensión mediante la determinación de la turbiedad, para ello se emplean nefelómetros o espectrofotómetros.
La suspensión microbiana se deposita en una cámara o tubo claro, sedirige a una fuente de luz constante hacia la suspensión (luz incidente) y mediante una celda fotoeléctrica se registra la intensidad de luz transmitida que sale de la cubeta.
DENSIDAD ÓPTICA
Es la medida de la luz transmitida a través de la suspensión. Para medir esta absorbencia o densidad óptica se usa un espectrofotómetro.
Un espectrofotómetro mide la cantidad de luz que transmite una solucióno un cultivo liquido de células microbianas. Cuanto mayor masa de células tenga un cultivo, mayor será su turbidez, se transmutara menos luz, y la lectura en el espectrofotómetro será mayor
Los resultados se compraran con una curva estándar construida con una suspensión testigo de concentración celular conocida. Como ejemplo de esta se tiene la escala de Mc Farland, la que se basa en la mezclade concentraciones crecientes de cloruro de bario con concentraciones decrecientes de acido sulfúrico, obteniéndose un precipitado de sulfato de bario en cantidades diferentes
La turbidez producida por cada mezcla ha sido calibrada para aproximar un cierto numero de bacterias por unidad de volumen. Es decir, la turbiedad que resulta de agitar bien una de estas mezclas, se aproxima a la producidapor un cierto numero de bacterias en suspensión.
BIOLOGIA DE LA ESPECIE
Pseudomonas fluorescens, es un bacilo Gram-negativo recto o ligeramente curvado, es saprófito (todo lo que ingiere pasa a través de la pared de su citoplasma). Se puede encontrar en suelo y agua.
Es incapaz de formar esporas y crece aeróbicamente. La temperatura óptima para su funcionamiento es de 25 a 30 ºC, aunque...
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