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PRACTICA No. 2

TITULO:

“MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN Y PREPARACIÓN DE AGARES“

OBJETIVO: El alumno utilizara la autoclave de vapor como método de esterilización de los materiales y agares bacteriológicos.

INTRODUCCION:
La esterilización consiste en la destrucción rigurosa de todos los microorganismos al contacto con el agente esterilizante; la finalidad de este procedimientoconsiste, en eliminar competencia por nutrientes en un medio de cultivo para permitir que se desarrolle un microorganismo especifico, prevenir la descomposición de substancias y evitar la transmisión de enfermedades.
Los diversos métodos de esterilización se dividen en:

1) Métodos físicos tales como: calor, rayos ultravioleta, filtración, etc.

2) Métodos químicos en donde se utilizan substanciasbactericidas o bacteriostáticas como son: alcoholes, fenoles, halógenos, detergentes, etc. La elección del método de esterilización depende del tipo de material a esterilizar, así como la finalidad que se persiga.

I.1. La esterilización por calor es uno de los métodos comúnmente utilizados en el laboratorio, para la cristalería, medios de cultivo y para los cultivos antes de desecharlos.La esterilización por calor puede ser:

a) Húmedo
b) Calor Seco
c) Calor Directo


a) Calor Húmedo

Se utiliza para esterilizar medios de cultivo, se realiza mediante vapor a presión en autoclave (Chamberland) u olla de presión.

Descripción de la autoclave. Es un cilindro de acero inoxidable queconsta de los siguientes elementos:


- Un fondo de acero inoxidable con resistencia eléctrica.
- Un nivel con llave de paso para fluido de agua al cual se puede
- Fijar solidamente una tapadera de acero inoxidable por medio de
pernos.
Un empaque ó junta de hule para asegurar su hermeticidad.
Una tapadera que contiene un indicador de presión, una válvula de seguridad yuna válvula de escape de vapor.
Un control de tres temperaturas (bajo, medio y alto).
Un foco piloto.
Una cesta metálica.


b) Calor seco
Paso 1
Descontamine, limpie y seque todo instrumental y demás objetos a esterilizar.
 
Paso 2
Coloque el material en bandeja o estante, introduzca el instrumental y demás objetos en el horno y enciéndalo a la temperatura designada. Es necesarioque el horno tenga termómetro o indicador de temperatura, para verificar que ha llegado a la temperatura correcta.
 
Utilice la siguiente lista para determinar la duración apropiada de tiempo que corresponde a temperaturas diferentes para esterilizar el instrumental y otros objetos. (No empiece a regular el tiempo hasta que el horno llegue a la temperatura correcta; además, no abra la puertadel horno ni agregue ni saque objetos del horno). Las duraciones susodichas representan el tiempo que los objetos necesitan estar a la temperatura deseada, para comprobar que se logre esterilizarlos. Tenga en cuenta que el ciclo total-que incluye calentar el horno a la temperatura correcta, el mismo proceso de esterilizar y el período de enfriar-suele variar.
 
Temperatura
170 °C - 1 hora
160°C - 2 horas
150 °C - 2,5 horas
140 °C - 3 horas

 
Nota: Los instrumentos afilados o puntiagudos, incluso agujas, no se deberán esterilizar a una temperatura mayor de 160 °C.
Paso 4.
Esperar que los objetos se sequen en el horno antes de sacarlos y utilizando pinzas esterilizadas; úselos o guárdelos inmediatamente.
Objetos envueltos Bajo condiciones óptimas de almacenaje, seconsiderarán esterilizados los objetos envueltos correctamente. Para almacenar los materiales se requiere de estantes aislados en áreas secas o de baja humedad, de temperatura moderada. Si existe duda de que si un paquete está esterilizado o no, habrá que considerarlo contaminado y volver a esterilizarlo.
Objetos sin envolver. Después de sacar del autoclave los objetos sin envolver, utilícelos...