Técnicas De Colecta Y Tincion

Técnicas de colecta y tinción de parásitos

24 de septiembre

2008
Práctica III

Las tinciones se utilizan para diferenciar fácilmente la morfología y estructura de los organismos en observación. Los colorantes modifican el índice de refracción de las sustancias que colorean.

[TÉCNICAS DE COLECTA Y TINCIÓN DE 24 de septiembre de PARÁSITOS] 2008

Técnicas de colecta y tinción deparásitos
Práctica 3
Universidad Nacional Autónoma de México. Facultad de Estudios
Superiores Zaragoza, UNAM. Av. Guelatao 66, Col. Ejército de Oriente, 09230 México D.F. Laboratorio de Microbiología L-121 Pérez Pérez José Manuel, Equipo 1, Grupo 1701

Introducción:
MÉTODOS DE COLORACIÓN:
Se utilizan para diferenciar fácilmente la morfología y estructura de los organismos en observación. Loscolorantes modifican el índice de refracción de las sustancias que colorean. COLORACIÓN DE GIEMSA: se emplea en Hematología para observar los elementos sanguíneos normales y en Microbiología para identificar parásitos (protozoarios de la sangre y los tejidos), espiroquetas, levaduras y hongos (Chlamydia). Observación: Los núcleos de células y protozoarios se observan en color, el citoplasma en colorazul claro. Los eritrocitos en color gris claro. Utilidad: se emplea principalmente en frotis sanguíneos para observar a los agentes patógenos junto a las células sanguíneas y mostrar las diferencias entre ambos. Se ponen en evidencia la morfología y estructura de los microbios. Estas diferencias pueden ayudar al diagnóstico certero de varias enfermedades infecciosas de la sangre. Nota: Elcolorante de Giemsa es un colorante compuesto ya que es una mezcla de varios colorantes. Por esto se dice que la coloración de Giemsa es una coloración compuesta o diferencial (ya que emplea más de un colorante). Fundamento: se basa en la distinta afinidad que demuestran las células y sus componentes a los distintos colorantes incluidos en el colorante de Giemsa. Técnica: se realiza el extendido de lagota de sangre (gota gruesa del pulpejo del dedo gordo). Se deja secar, se cubre con la solución de Giemsa, se lava con agua y se observa. El fijador (metanol o etanol) se usa cuando se cuentan con muestras de tejidos, no debe usarse con extendidos de sangre. Resultados erróneos: se deben principalmente a errores durante el extendido sanguíneo o durante la aplicación del fijador. La tinción de Giemsaemplea como colorante fundamental, una mezcla de tiácinicos catódicos, como el

azur A,B y azul de metileno, que colorean el núcleo, mientras que la eosina para coloración citoplasmática, estas sustancias están disueltas en alcohol metílico. Su fundamento está en la disociación controlada de las sales de eosinato, que ocurre por la mezcla de Giemsa con agua destilada. La cromatina nuclearadopta la tinción azul violácea algo distinta a la habitual para los colorantes tiacínicos y que recibe la denominación de efecto Giemsa Resultaos e interpretación: Los eritrocitos se tiñen de rosa Las plaquetas de violeta Los núcleos de los leucocitos de violeta El citoplasma de los leucocitos es rosa. La tinción de Giemsa al igual que la tinción de Wright sirven para la identificación de parásitostales como el Paludismo en los cuales es conveniente un tiempo de 30 minutos hasta una hora para Giemsa y de tres a cinco minutos para Wright aunque se podrían obtener mejores resultados si se le deja a éste ultimo hasta por 15 minutos. El método de Wright brinda buenos resultados y requiere de muy poco tiempo, pero se obtiene detalles más precisos con la tinción de Giemsa. El método de Wright solose puede aplicar a frotis delgados mientras que en Giemsa se pueden usar frotis delgados y frotis de gota gruesa omitiendo el paso de fijación con alcohol metílico. Las preparaciones en fresco son utilizadas principalmente para la identificación de Tripanosomas y microfilarias; los frotis teñidos (delgados) sirven para identificar diferencias morfológicas de protozoarios en células sanguíneas,...