Técnicas rápidas de mibrobiología

U 8. TÈCNIQUES
RÀPIDES EN
MICROBIOLOGIA
Assajos Microbiològics
Curs 2014-2015
IES Pare Vitòria (Alcoi)
Francesc Seguí Andrés

NECESSITATS EN ELS ANÀLISIS
D’ALIMENTS
 
 

• Métodos cada vez más rápidos
(industrias, laboratorios)
 

• Métodos sencillos
 

• Métodos fiables
 

• Métodos reconocidos
 

• Métodos trazables
 

• Métodos sensibles
 

TÈCNICA MICROBIOLÒGICA RÀPIDA
Los métodos rápidos yautomatizados
en microbiología de los alimentos…,
requieren un tiempo reducido para la
obtención de los resultados en
comparación con los métodos
“convencionales”, y son fáciles de
usar, precisos y económicamente
rentables.

AVANTATGES
 

¾Preciso
 

¾Rápido y productivo
 

¾Económico sin contar los equipos
 

¾Aceptable
 

¾Realización simple
 

¾Entrenamiento
 

¾Reactivos comunes
 ¾Reputación de la compañía
 

¾Buen servicio técnico

PRECISIÓ I EXACTITUD

INCONVENIENTS
• Infraestructura inicial. Costos
d’equips
• Utilització de kits amb compostos de
reactius subjectes a caducitat
• Limitació d’ús
• Llindar de detecció
• Rebuig inicial, por a allò desconegut

TIPUS DE TÈCNIQUES SEGONS LA
METODOLOGIA APLICADA

• Bioquímics
• Elèctrics
• Immunològics
• Físics
• Genètics

MEDIOSCROMOGÉNICOS Y FLUOROGÉNICOS
Colonias violetas,
Mucosas.
Fluorescencia amarilloverdosa

FLUOROGÉNICOS

CROMOGÉNICOS
Para la realización de estas
técnicas el anticuerpo se
marca con un fluorocromo
detectándose la formación del
complejo Ag-Ac por la
fluorescencia emitida.

•
•

Orientación
Selectivos

MÉTODOS CROMOGÉNICOS Y FLUOROGÉNICOS
VENTAJAS.
• Eliminan la necesidad del subcultivo.
• Eliminan laelaboración de numerosas pruebas
bioquímicas economizando tiempo y dinero.
DESVENTAJAS:
• La actividad enzimática de los microorganismos.
• Interpretación de los colores por parte del operador.
Sin embargo con respecto a esto último se han
desarrollado equipos que facilitan la lectura de las
placas.

TÈCNIQUES MINIATURITZADES

PLACA EN ESPIRAL

Siembra en espiral acelerada de susplacas de Petri. La principal ventaja
de este equipo es conseguir de una
sola vez y en una única placa de Petri
todas las diluciones que se hacen con
el
método
tradicional
y
sus
posteriores resiembras.

Principio
del
método
Spiral® 
Un volumen fijo de la muestra se siembra
siguiendo la forma de una espiral logarítmica,
con un volumen decreciente en la placa de Petri;
luego la incubación de lasuperficie sembrada se
divide en sectores cuya zona y volumen de la
muestra se conoce con precisión. Al contar el
número de colonias en cada zona, la
concentración
se
puede
calcular
instantáneamente con una rejilla o con un
contador automático de colonias.

PETRIFILM

TÈCNIQUES ELÈCTRIQUES. IMPEDÀNCIA

La detección de microorganismos por Impedancia Directa se basa en la
capacidad de losmicroorganismos de metabolizar las moléculas del medio
de cultivo, para crecer. Los nutrientes del medio de cultivo (glúcidos,
proteínas...) son moléculas eléctricamente neutras o están débilmente
ionizadas. Estas moléculas son metabolizadas por los microorganismos en
crecimiento, y transformadas en moléculas más pequeñas, con polaridad y/o
carga eléctrica, como por ejemplo ácido láctico, acético, cítrico,aminoácidos...
El efecto final de esta actividad metabólica es un incremento de la
conductividad eléctrica del medio de cultivo, medible mediante dos
electrodos sumergidos en el medio de cultivo.
De este modo se puede establecer una correlación entre cambios en la
impedancia eléctrica y la concentración inicial de microorganismos en la
muestra: cambios rápidos de la conductividad del medio decultivo son
debidos a elevadas poblaciones microbianas, y lentos, a una menor carga
microbiana inicial.
Del mismo modo la no variación de la impedancia del medio de cultivo a lo
largo del tiempo es una indicación de ausencia de microorganismos viables.

IMPEDÀNCIA DIRECTA

IMPEDÀNCIA INDIRECTA
Algunos microorganismos, como los mohos y levaduras, de
crecimiento lento, pueden ser detectados más...