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REACCIONES DE AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Introducción
Las proteínas son polímeros de alto peso molecular, compuestos por aminoácidos unidos entre sí por enlaces peptídicos, que cuando se solubilizan son de dimensiones coloidales. Presentan propiedades químicas y físicas que dependen directamente de factores extrínsecos, como puede sel el pH, la temperatura, la presencia de sales, etc.
Existenvarios métodos para la identificación y cuantificación de las proteínas, pero la mayoría tiene como principio alguna reacción química característica de los grupos R de los diferentes aminoácidos.
Puede decirse que las proteínas reflejan las propiedades químicas de los residuos de aminoácidos que contienen, por lo que la mayoría de las reacciones coloridas de identificación dependen de la existenciade un aminoácido específico en ellas.

Objetivos

• El alumno realizará algunas reacciones coloridas específicas para la identificación de los aminoácidos que constituyen a una proteína.
• El alumno comprenderá la importancia de estas reacciones para distinguir las proteínas.


Materiales Y Métodos.

Acido oxálico (sol. Saturada) Hidróxido de sodio al 10%
Acidoacético glacial Acetato de plomo al 5%
Reactivo de biuret Ninhidrina al 1% en butanol saturado
Gelatina al 5% con regulador de fosfatos 0.06M,
Peptona al 5% pH 7.4.
Albúmina al 5% Acido nítrico concentrado.Tirosina al 1% Hidróxido de amonio concentrado
Triptofano al 1% Oxido rojo de mercurio
Fenilalanina al 1% Nitrito de sodio
Cisteína al 1% Magnesio en polvo o granallas
Arginina al 1%

Gradilla
Tubos de ensayo
Pipetas de 1,5 y 10ml
Vaso de precipitados de 100 ml
Baño maría
Agitador de vidrio
Pinzas para tubo

REACCION DEL PLOMO PARA CISTEINA.- Es una reacción característica para grupos sulfhidrilos.

METODOLOGIA.
a) Adicionar a 1 ml de las soluciones problema 2 ml de NaOH al 10% y calentar ligeramente. Adicionar de 3 a 5 gotas de acetato de plomo al 5% y calentar nuevamente hasta ver la aparición de un precipitadonegro.
b) Anotar los resultados y observaciones en la tabla correspondiente.

REACCION DE LA NINHIDRINA.- Es una reacción característica para grupos amino libres.

METODOLOGIA.
a) Adicionar a 1 ml de las soluciones problema, 5 gotas de la solución de
Ninhidrina en butanol. Observar a temperatura ambiente la aparición de un color azul o violeta que se debe a la presencia de los gruposamino libres; si es necesario, calentar en baño maría 1 ó 2 minutos los tubos en los que no aparece el color.
b) Anotar los resultados y observaciones en la tabla correspondiente.

REACCION DE HOPKINS-COLE.- Esta reacción es característica del anillo indol y por lo tanto del triptófano, por ser éste el único aminoácido que contiene este grupo.
El reactivo contiene ácido glioxílico que se preparapor reducción del ácido oxálico con magnesio en polvo o amalgama de sodio. Numerosos aldehídos pueden dar una reacción similar con triptófano. La naturaleza del compuesto colorido formado no se conoce totalmente.
Los cloratos, nitritos y cloruros interfieren en la reacción.

METODOLOGIA.
a) Adicionar a 1 ml de las soluciones problemas, 5 gotas del reactivo de
Hopkins-Cole y mezclar bien.Estratificar cuidadosamente con 1 ml de ácido sulfúrico concentrado, procurando que se forme un límite bien definido entre ambos líquidos. La aparición de un anillo violeta-rojizo en la interfase es una prueba positiva de la presencia del triptófano.
b) Anotar en la tabla correspondiente los resultados y observaciones.

REACCION DE MILLON.- El reactivo de Millon contiene una mezcla de nitritos...