Un Nuevo Espacio Intermembrana De Metas De Los Muelles De La Señal En Cisteínas Mia40 Durante El Plegamiento Oxidativo Mitocondrial

Un nuevo espacio intermembrana de metas de los muelles de la señal en cisteínas Mia40 durante el plegamiento oxidativo mitocondrial

Mia40 importaciones Cys-que contiene las proteínas en el espacio intermembrana mitocondrial (IMS), asegurando que sus Cys-dependiente plegables oxidativo. En este estudio, mostramos que la Cys específicos del sustrato involucrado en acoplamiento con Mia40 esdependiente del sustrato, el proceso está guiado por una señal de IMS-targeting (ITS) presentes en Mia40 sustratos. El SU es un péptido de 9 aa interna que (a) es anterior o posterior del acoplamiento Cys, (b) es suficiente para atravesar la membrana externa y para orientar las proteínas mitocondriales, (c) forma una hélice anfipática con cruciales residuos hidrofóbicos en la los laterales de losresiduos cargados de acoplamiento Cys y prescindible en el otro lado, y (d) se ajusta complementaria al sustrato hendidura de Mia40 a través de interacciones hidrofóbicas de afinidad micromolar. Hemos de racionalizar la doble función de Mia40 como un receptor y una oxidasa en un mecanismo de paso específica de dos: una ITS-guía de deslizamiento orienta paso del sustrato no covalentemente, seguido deacoplamiento del sustrato Cys ahora yuxtapone a par con la Cys Mia40 activos.

Introducción
Cys que contienen proteínas de el espacio intermembrana mitocondrial (IMS) son doblados por oxidación Mia40 a través de la formación de disulfuros mixtos transitoria (Chacinska et al, 2004;. Naoe et al, 2004;. Mesecke et al, 2005;. Rissler et al. , 2005; Terziyska et al, 2005, 2007;. Gabriel et al, 2007;.infierno, 2008; Müller et al, 2008;. Reddehase et al, 2009).. Mia40 también funciona como un receptor de reconocimiento de estos sustratos por un mecanismo desconocido. La evidencia actual apoya el reconocimiento de sitios específicos de la Cys sustrato-docking. Por ejemplo, la base de Tims pequeños Mia40 a través de su N-terminal Cys, que se empareja con el extremo C-terminal de Cys en un puentedisulfuro exterior en el estado plegado (Milenkovic et al, 2007;. Sideris y Tokatlidis, 2007). Por el contrario, Mia40 oxida el par disulfuro interno de COX17, sorprendentemente ya diferencia de los TIM pequeño (Banci et al., 2009). La hora exacta de Cox17 Cys utilizado para el acoplamiento es aún desconocido. La reciente Mia40 estructura de la solución al descubierto una hendidura hidrofóbica quese encuentra adyacente al sitio activo motivo del PCCh y fue propuesto para ser el dominio de unión a sustrato. La evidencia de esta propuesta se basó en la mutagénesis de los residuos de Mia40 en esta hendidura tienen un efecto letal en vivo y la disminución de la unión del sustrato in vitro (Banci et al., 2009). Sin embargo, todavía no se sabe que los segmentos objetivo del sustrato a Mia40para permitir pairing.In covalentes corregir este estudio, se describe la señal para orientar las diferentes clases de sustratos a Mia40 (IMS de metas de la señal de [su]). Una señal similar a la ITS se informó por Milenkovic et al. (2009) sólo para los TIM pequeñas y se llaman mitocondrias IMS de clasificación de la señal (MISS). Nuestros datos sugieren una coincidencia parcial entre las ITS y lassecuencias de Miss y revela funciones adicionales para el SUS no se informó antes. Para evitar confusiones, nos referimos a esta señal como Miss / ITS.The Miss / ITS es un péptido de nueve residuos que se encuentran en prácticamente todos los sustratos y primos Mia40 Cys para el acoplamiento con el sitio activo Mia40 CPC motivo (Banci et al., 2009 un ; Terziyska et al, 2009).. El concurso de Miss /ITS es necesario y suficiente para IMS dirigidos a Mia40. Eliminar el resultado es la pérdida total de las importaciones, mientras que la fusión a una proteína mitocondriales que se dirige a los orgánulos. El ITS contiene la información necesaria para el desplazamiento a través de la membrana externa (OM), independientemente de Mia40, por lo tanto experimentalmente desacoplar estos dos...