Un Ratoncín

Degradación y síntesis de ácidos nucleicos in vitro
In vivo Metabolismo
Degradación de ácidos nucleicos
Química: pH

Bajo: DNA y RNA

Alto: sólo RNA

In vitro

Se degradan y sintetizan ac.nucleicos controladamente

DNasa

DNasa I ExoIII S1 Bal 31

Purificación y manipulación de ac. nucléicos para experimentos de ingeniería genética
CURSO BIOTECNOLOGÍA VEGETAL y ANIMAL-IBT-FCB,UANL

Enzimática RNasa

RNasa H RNasa A RNasa T1

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Degradación Química: pH
•Hidrólisis de grupos fosfodiéster (DNA y RNA) pH ≤ 1 •Ruptura deenlaces N-glucosídicos (BN—Azúcar) •Se utiliza para determinar la composición de bases de un ác. nucleico Química: pH

Bajo: DNA y RNA

Alto: sólo RNA

pH ≈ 4 •Depurinización por ruptura deenlaces N-glucosídicos pH alto •DNA resiste la hidrólisis •RNA a pH 11 y 37°C se hidroliza totalmente en pocos minutos •DNA depurinizado sensible a pH alto (ruptura del enlace fosfodiester 5´ de ladeoxirribosa donde falta la purina.

Degradación de ácidos nucleicos

DNasa

DNasa I ExoIII S1 Bal 31

Enzimática RNasa

RNasa H RNasa A RNasa T1

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NUCLEASAS Enzimas que catalizan la hidrólisis de los enlaces fosfodiéster Normalmente catalizan la degradación los ácidos nucleicosdañados.

DNA asas-DESOXIRIBONUCLEASASactúan sobre DNA.

RNA asas-RIBONUCLEASASactúan sobre RNA.
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DNasa I
•Endonucleasa que hidroliza DNA de cadena sencilla y doble •Prefierecortar detrás de pirimidin nucleótidos •Con Mg2+ actúa al azar cualquiera de las dos cadenas y produce mellas •Con Mn2+ corta ambas cadenas casi en el mismo lugar

Exonucleasa III de Escherichia coli...