Unidad De Investigacion Patricio Candia 2

UNIVERSIDAD DE CHILE
FACULTAD DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA


“Extracción, Cuantificación y Determinación Simultánea de Florfenicol y Acido Oxolínico en músculo de salmón.”


Unidad de investigación conducente al grado de
Licenciado en Ciencias mención Química.

PATRICIO IGNACIO CANDIA INOSTROZA.

Profesora Guía
María Inés Toral Ponce

SANTIAGO DE CHILEDICIEMBRE 2013
AGRADECIMIENTOS

SE AGRADECE EL FINANCIAMIENTO DE ESTA INVESTIGACIÓN AL PROYECTO FONDECYT N° 11000103.
ETCÍNDICE DE CONTENIDOS
ÍNDICE DE CONTENIDOS …………………………………………………… iii
ÍNDICE DE TABLAS ……...…………………………………………………… vi
ÍNDICE DE FIGURAS ………………………………………………………… X
LISTA DE ABREVIATURAS …………………………………………………. x
RESUMEN ……………………………………………………………………… x
1. INTRODUCCIÓN………………………………………………………….. x
1.1. ASPECTOS GENERALES DE LA INDUSTRIA SALMONERA ……......... 1
1.1.1. ANTECEDENTES GENERALES …..……………………………....... 1
1.2. ENFERMEDADES BACTERIANAS DE LOS SALMONIDOS …………... 3
1.2.1. FÁRMACOS EMPLEADOS EN SALMONES …………………….... 6
1.2.2. FLORFENICOL ………………………………………………………. 7
1.2.3. ÁCIDO OXOLÍNICO ………………………………………………… 8
1.3. FUNDAMENTOS DE LA ESPECTROFOTOMETRÍA …………………... 10
1.3.1. ESPECTROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA ……………………… 10
1.3.2.ANTECEDENTES HISTÓRICOS ………………………………..… 10
1.3.3. TEORIA DE LA FLUORESCENCIA …………………………….… 11
1.3.4. FUNDAMENTOS DE LA ESPECTROFOTOMETRÍA DERIVADA 12
1.3.5. PARÁMETROS ANALÍTICOS …………………………………….. 21
1.3.5.1. EXACTITUD ………………………………………………... 21
1.3.5.2. PRESICIÓN ………………………………………………….. 21
1.3.5.3. LÍMITE DE DETECCIÓN ………………………………...… 22
1.3.5.4. LÍMITE DE CUANTIFICACIÓN ………………………...… 22
1.3.6.INSTRUMENTACIÓN ……………………………………………… 22
1.4. HIPÓTESIS Y OBJETIVOS …………………………………………..…… 25
1.4.1. HIPÓTESIS ………………………………………………………….. 25
1.4.2. OBJETIVO GENERAL ……………………………………………... 25
1.4.3. OBJETIVOS ESPECÍFICOS ………………………………………... 25
2. METODOLOGÍA EXPERIMENTAL ………………………………………….. 26
2.1. Equipos …………………………………………………………………...… 26
2.2. Materiales …………………………………………………………………… 26
2.3.Reactivos…………………………………………………………………..… 26
2.4. Procedimiento experimental ……………………………………………….. 27
2.4.1. Preparación de soluciones …………………………………………… 27
2.4.2. Curvas de calibración de estándares …………………………………. 27
2.4.3. Preparación del músculo de salmón ……………………………….… 27
2.4.4. Extracción desde musculo de salmón …………………………….… 28
2.4.5. Determinación simultanea ………………………………………….. 28
2.4.6. Tratamiento de datos ………………………………………………… 28
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN…………………………………………………… 29
3.1. Estudios preliminares ………………………………………………………. 29
3.2. Espectros de Emisión de Fluorescencia en ACN …………………………. 30
3.2.1. E.E.F. de FLOR en ACN a diversas longitudes de excitación …….. 30
3.2.2. E.E.F. de FLOR en músculo de salmón y estándares a diversas longitudes de excitación ……………………………………………….. 36
3.2.3. E.E.F. de OXO en ACN a diversas longitudes de excitación ……… 42
3.2.4. E.E.F. de OXO en músculode salmón y estándares a diversas longitudes de excitación ……………………………………………... 48
3.3. Información resumida de los E.E.F. de OXO y FLOR en músculo de salmón ………………………………………………………………………………. 54
3.4. Determinación simultánea ………………………………………………… 55
3.4.1. Parámetros obtenidos a partir del espectro emisión de fluorescencia (E.E.F) ………………………………………………………………. 56
3.4.2. Parámetros obtenidos a partir dela derivada de primer orden del espectro emisión de fluorescencia (E.E.F) ………………………….. 57
3.4.3. Parámetros obtenidos a partir de la derivada de segundo orden del espectro emisión de fluorescencia (E.E.F) ………………………….. 58
3.5. Determinación de OXO en presencia de FLOR a una longitud de excitación de 337 nm …………………………………………………………………….... 59
4. CONCLUSIONES ………………………………………………………………...… 60
5.BIBLIOGRAFÍA …………………………………………………..………………... 61

ÍNDICE DE TABLAS
Tabla I: Exportaciones pesqueras por recursos desde enero a octubre 2013 ……….… 3
Tabla II: Fármacos utilizados en la industria chilena conjuntamente con sus LMR según la normativa chilena …………………………………………………………... 7
Tabla III:...