Unidad II Principios De La Cromatografia

11/05/2014

Química Analítica
Unidad II

“Separaciones

Cromatográficas”

Principios

M. en C. Ma rt ha Hernández
La bra

Historia

• Fue
inventada y
denominada así, a
principios del siglo
XX por el botánico
ruso Mikhail Tswett.

• Sus
estudios
pioneros
se
enfocaron en la
separación
de
clorofilas
y
xantofilas usando
un solvente en una
columna
empacada
con
CaO y alumina.

F. F. Runge químicoalemán, describió el
proceso de separación que actualmente se
conoce como cromatografía en papel.
El ruso Mijail Tswett corresponde el haber
establecido las ventajas de la cromatografía
y la adopción parcial de la terminología,
también fue quien sentó las bases de los
principales procedimientos experimentales
relativos a ésta técnica.

• El nombre fue dado
por Tswett , viene del
griego chroma quesignifica color y
graphien que significa
escritura, literalmente:
escritura de color.

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Definición
• Método de separación en el que se
aprovechan
las
diferencias
en
el
comportamiento de partición entre una fase
móvil y una fase estacionaria para separar
los componentes de una mezcla.
• Es una técnica de separación basada en la
diferente velocidad con que se mueven los
solutos a través deun medio estacionario
mediante el flujo en un disolvente llamado
eluyente o fase móvil.

La fase estacionaria:
• Consiste en partículas, generalmente sólidas, pequeñas y con una
superficie microporosa, de forma
que presenta un amplio desarrollo
superficial. Puede estar empaquetada en forma de columna o
extendida en forma de capa.

Definición de Términos
• En
todas
las
separaciones
cromatográficasparticipan: una fase
móvil y una fase estacionaria

Fase Estacionaria
Sólidos muy porosos con
capacidad adsorbente: Gel de
sílice (SiO2); Alúmina (Al 2O3),
Celita
La superficie del gel de sílice
interacciona con los compuestos
orgánicos mediante
interacciones de carácter polar:
• Puentes de hidrógeno
• Interacciones electrostáticas

Los compuestos más polares
interaccionan
más fuertemente con lasílica

La fase móvil:
• Puede ser un
líquido o un gas, y
su función es
transportar a los
componentes de la
mezcla a través
del sistema cromatográfico.

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Fase móvil
En cromatografía de líquidos
(columna, capa fina, HPLC) la
fase móvil es una mezcla de
disolventes llamada:
ELUYENTE
En cromatografía de gases la
fase móvil es el
GAS PORTADOR.

El Eluyente puede ser:
• Una soluciónisocrática que consiste
en el empleo del mismo eluyente para
lograr la separación.
• Una elución por gradiente que
consiste en mezclar dos o mas
eluyentes distintos de modo que la
composición de la fase móvil cambie
con el trascurso del tiempo.

Naturaleza del eluyente:
Eluyentes polares:
Rompen más
eficazmente las
uniones de los
compuestos con la
fase estacionaria.
Arrastran más
rápidamente a loscompuestos.

Tendencias en las Fases móviles mas
empleadas y en Compuestos a
Separar
Eluyentes no
polares:
No rompen las
uniones de los
compuestos con la
fase estacionaria.
Arrastran muy
lentamente a los
compuestos.

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Técnicas manuales de laboratorio

Clasificación

-Cromatografía de columna
-Cromatografía de capa fina TLC
Técnicas instrumentales

-Cromatografía de gases GC
-Cromatografíade líquidos LC
-Cromatografía de líquidos de alta eficacia:
HPLC

Clasificación de acuerdo al sentido de flujo de
la fase móvil
-Cromatografía ascendente
-Cromatografía descendente
-Cromatografía en flat-bed

Clasificación de acuerdo a la forma física gral.
de FE
-Cromatografía en Columna
-Cromatografía de líquidos Capilar
-Cromatografía de Capa Fina

Clasificación de la Cromatografía segúnMecanismo de Separación

- Cromatografía de Reparto
- Cromatografía de Exclusión
- Cromatografía de Adsorción
- Cromatografía de Intercambio Iónico
Esta es la clasificación con más relevancia, debido a todo el
estudio alrededor de dicha separación. La cromatografía
líquida también se clasifica de igual manera.

Tipos de Cromatografía líquida
• Cromatografía de Partición.
• Cromatografía de...