Universidad Interamericana de Puerto Rico

Universidad Interamericana de Puerto Rico, Recinto de Arecibo
Departamento Ciencias y Tecnología


















Actividad enzimática

















Amaris Barrios Soto
R00475507
BIO 1103-Laboratorio de destrezas
José F. Rodríguez Santiago


Introducción:

Las enzimas son moleculas de naturaleza proteica y estructural que catalizan reacciones químicas, siempre que sean termodinámicamenteposibles: una enzima hace que una reacción química que es energéticamente posible (ver Energía libre de Gibbs), pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea cinéticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. Con los experimentos a continuación apreciaremos como es que trabajan las ezimas. Por ejemplo a que temperatura trabajan mejor lasenzimas.




































Procedimiento de la preparación del extracto de papa para realizar los siguientes experimentos:

Removimos la cascara de una papa y la descartamos. Pesamos 125 gramos de papa, la cortamos en pedazos pequeños y los colocamos en una licuadora con 60mL de agua destilada fría. Luego, utilizamos dos capas de gasa para filtrar la mezcla. Finalmente colocamos elextracto de papa en un vaso de 100 mL y lo mantuvimos en el hielo todo el tiempo.

Formación y detección de benzoquinona


Escala de intensidad de benzoquinona
Color
0
Crema/transparente
3
Marrón claro
5
Marrón oscuro


Si en la escala de intensidad hay un 0 es que no hay presencia de benzoquinona. Cuando se encuentra un 3 en la escala es que la presencia debenzoquinona es leve. Al ver un 5 en la escala es porque hay benzoquinona a mayor cantidad.

Procedimiento para el experimento:

Cogimos tres tubos de ensayo y en cada tubo le hicimos marcas de 1 cm y de 2cm desde el fondo. Añadimos los siguientes reactivos a los tubos: En el primer tubo añadimos extracto de papa(1cm) y catecol(2cm). Luego, en el segundo tubo añadimos extracto de papa(1cm) y aguadestilada(2cm). Finalmente en el tercer tubo añadimos catecol(1cm) y agua destilada(2cm). Cuando añadimos cada sustancia en su tubo correspondiente, mezclamos en el vortex el contenido que estaba en cada tubo. Colocamos los tubos en un baño de agua de 40 grado Celsius. Observamos el color de cada tubo a los 5 minutos y luego a los 10 minutos. Anotamos en la escala de intensidad si era 0, 3 o 5.Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3
Tiempo(min)
Extracto de papa y catecol
Extracto de papa y agua destilaa
Catecol y agua destilada
0
5
0
0
5
5
0
0
10
5
0
0


No ocurre reacción porque los inhibidores no lo permiten.


TuboEscala de
intensidad
color
Control positivo y negativo
#1
5
Marrón oscuro
Positivo
#2 y #3
0
Marrón claro
Negativo


Inhibición competitiva

Cogimos dos tubos de ensayo y los enumeramos, marcamos los tubos de ensayo a 1cm y 2cm desde el fondo. Añadimos en el primer tubo extracto de papa(1cm) y 1% catecol(2cm). El el segundo tubo le añadimosextracto de papa(1cm) y 1% hidroquinona(2cm). Cuando ya tenemos las sustancias en cada tubo los mezclamos en el vortex. Colocamos los tubos en el baño de agua a 40 grados Celsius. Observamos el color de cada tubo a los 5 y 10 minutos. Luego, anotamos en la escala de intensidad(0, 3 o 5) en la tabla


Tiempo
(min)
Tubo#1
concatecol
Tubo#2
con hidroquinona
0
5
3
5
5
3
10
5
5


En el tubo #2 que contenia hidroquinona tuvo un resultado menor que el tubo #1 que contenia catecol.

Inhibición alosterica...