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Prueba del número más probable (NMP) para recuento de coliformes totales
http://universitas.usal.es/web/fundacion/universitas/es/index_online.htm
La técnica se basa en la determinación delnúmero de coliformes mediante siembra de distintos volúmenes del agua a analizar en series de tubos con caldo lactosado y resiembra en medios de cultivo selectivos incubando a temperaturas adecuadas.
Elprocedimiento comprende las pruebas: 1. presuntiva, de confirmación de coliformes totales y 2. de confirmación de coliformes fecales. Esta prueba se utiliza en muestras con baja densidad demicroorganismos.

Prueba presuntiva para coliformes totales
En una gradilla se colocan 9 tubos (tres series de tres tubos) con caldo verde bilis brillante simple, con su respectiva campana de Durhan. Los tubosse marcan con las iniciales del grupo, el agua tratada o no tratada y la dilución correspondiente (100, 10-1, 10-2).

En la primera serie de tubos se distribuye diez ml de medio de cultivo en cadauno de los tubos y se siembra con una pipeta estéril 10 ml de la muestra de agua agitada, marcar 100
En la segunda serie se siembra en 10 ml de medio de cultivo , 1 ml de la muestra de agua, marcar10-1

En la tercera se siembra en 10 ml de medio de cultivo, 0,1 ml de la muestra de agua, marcar 10-2

Se coloca en cada tubo una campana Durham para recoger el gas producido y al medio de cultivo se lehabrá añadido un indicador ácido-base. Homogeneizar los tubos sembrados. Incubar a 37°C durante 48 h.

Lectura e interpretación

Se consideran tubos positivos aquellos en los que se observaenturbiamiento, acidez detectada por el indicador colocado en el medio que vira a color amarillo y por la aparición de gas en la campana de Durhan, independientemente de su cantidad.
Los Coliformes sonenterobacterias lactosa positiva, es decir, son capaces de fermentar la lactosa con producción de ácido y gas en un perìodo de 48 horas y con una temperatura de incubación comprendida entre 30-37ºC....