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Vacunas de nueva generación: una
alternativa para PRRSV
Se han evaluado varios sistemas de expresión de antígenos de PRRSV incluyendo bacterias,62,92,93 bacoluvirus,94 vacunas de ADN,95,96 adenovirus97,98 y el sistema del virus de Ankara (MVA, por sus siglas en inglés)99 en busca de una alternativa para mejorar la respuesta inmune contra el PRRSV o para utilizarse como vacunas. Se hanutilizado bacterias como Salmonella typhymurium y el bacilo de calmette-Guérin (BCG) de Mycobacterium bovis como vectores en la expresión de la GP5 y la proteína M del PRRSV, utilizando ratones como modelo de estudio.93,100 En el caso donde se utiliza el BCG, sólo se logró la expresión de GP5 después de remover los primeros 30 residuos hidrofóbicos de la glicoproteína. La GP5 y la proteína M seexpresaron en la membrana de Mycobacterium y se detectaron anticuerpos anti-GP5 y proteína M, también se detectaron células productoras de IFN-γ específicas del PRRSV en esplenocitos. Sin embargo, la respuesta en cerdos podría variar.101 Cuando se utilizó una cepa atenuada de S. typhymurium para evaluar la respuesta a la GP5 del PRRSV, se utilizó un plásmido que codificaba a la GP5, contenido en cepasde S. typhimurium. Sin embargo, en este caso la utilización de S. typhimurium como vector de expresión no marcó ninguna diferencia respecto a la utilización de ADN desnudo (plásmido que contiene la región que codifica a la GP5), resultando en ambos casos en una respuesta humoral y celular prácticamente nulas.100
También se ha evaluado el uso de virus como vectores de expresión para las proteínasGP5 y M del PRRSV en cerdos. Al virus de la seudorrabia (PRV, por sus siglas en inglés, causante de la enfermedad de Aujeszky) como vector de expresión, se le insertó la secuencia de la GP5 en el PRV y se obtuvo una vacuna doble dirigida al virus de Aujeszky y GP5-PRRSV. Esta vacuna redujo los daños causados por el virus en pulmón en cerdos infectados; sin embargo, no se detectaron niveles deAN.102,103 En contraste con estos resultados, cuando se utilizó el baculovirus (expresando el heterodímero GP5-M) en un modelo murino, se detectó un título alto de AN anti-GP5 y células productoras de IFN-γ. Sin embargo, la producción de IFN-γ no fue específica del PRRSV pues el baculovirus que no contenía el heterodímero GP5-M usado como testigo, indujo un nivel de células productoras de IFN-γsimilar.104 El virus de la viruela aviar también se ha utilizado como vector de expresión para PRRSV dirigido al heterodímero GP3/GP5 e incluyendo como adyuvante la IL-18 porcina en el plásmido.105 El potencial del virus de la viruela aviar como vacuna para PRRSV ofrece resultados alentadores.106 Utilizando este modelo en cerdos se observó una reducción de la carga viral en 151 Vet. Méx., 41 (2) 2010pulmones y algunos ganglios, se detectaron títulos bajos de AN durante las primeras semanas PI, que aumentaron de manera significativa a los 56 días PI. También se observó aumento de linfocitos CD4+ y CD8+, y a pesar de encontrarse un gran número de células productoras de IFN-γ se cuantificó un aumento de IFN-γ por ELISA en suero.105 Además del virus de la viruela aviar se utilizó un virusrecombinante de viruela modificado, conocido como virus de Ankara, el cual es un excelente sistema de expresión como vacuna.99 En este caso se expresó el heterodímero GP5/proteína M en modelo murino. Se obtuvieron AN a partir de la tercera semana posinoculación, pero con un título muy bajo, en la séptima semana posinoculación aumentó el título de AN. Este sistema indujo en los ratones ligera y tardíaproducción de IFN-γ, que se detectó a partir del día 30 posinoculación y se mantuvo hasta el día 90.99
Los adenovirus (Ad5) son excelentes sistemas para la expresión de genes de interés en el desarrollo de vacunas.107 Por ello también se han utilizado en el diseño de vacunas contra el PRRSV. Algunas de las construcciones que se han evaluado incluyen el Ad5 expresando GP5, la proteína M y su...