validaci n tecnica domperidona iny


VALIDACION DE LA TECNICA DE DOSIFICACION DE DOMPERIDONA INYECTABLE

Objetivo

La validación de un método analítico es un proceso por el cual se establece, por métodos de laboratorio, que el desempeño del método se ajusta a los requerimientos para el método analítico planteado.
El desempeño es expresado en forma de parámetros analíticos. Los parámetros analizados en este estudio son:Linealidad
Intervalo de trabajo
Precisión
Exactitud
Robustez

1. Introducción

El presente estudio de validación fue realizado sobre la forma farmacéutica Domperidona inyectable (10mg domp. /ampolla de aprox. 2ml) y sobre el estándar de Domperidona usando como método la cromatografía liquida de alta resolución (HPLC) en fase reversa.

2. Condiciones experimentales

2.1 Equipos

Cromatógrafo de líquidosde alta resolución: Bomba 590-MS Waters, Detector UV Waters 484, Columna Phenomenex Luna 5um; C18; 250 x 4.6mm.
Balanzas: Mettler H542 y Mettlee AJ100.
Ultrasonido: ultrasonic cleaner GB-928

2.2 Materiales y reactivos

Agua destilada
Metanol ppa
Acetato de Amonio ppa
Dimetilformamida ppa (DMF)
Domperidona, sustancia de comparación
Domperidona inyectable
Placebo

2.3 Condicionescromatográficas

Fase móvil: Mezcla filtrada y des gasificada de Metanol: Acetato de Amonio 5g/l (70:30)
Volumen de inyección: 20 ul
Flujo: 1.0ml/min
Detector: UV a 280nm
Temperatura: 55ºC
Tiempo corrida: 10 minutos

2.4 Preparación de la muestra y el estándar

Preparación del estándar

Pesar con exactitud aproximadamente 50 mg de estándar en un matraz aforado de 50.0 ml. Disolver y llevar a volumen conDimetilformamida y llevar a volumen con mismo solvente. Diluir 1 a 10 con fase móvil. Filtrar

Preparación de la muestra

Inyectables:

Pesar con exactitud aproximadamente 2 g de la muestra en un matraz aforado de 10.0 ml. Llevar a volumen con dimetilformamida. Diluir 1/10 con fase móvil. Filtrar

2.5 Procedimiento

Dejar equilibrar el sistema con la fase móvil.
Inyectar la solución de estándar portriplicado, promediar las áreas y calcular la desviación estándar, ésta no deberá ser mayor a 2%.
Inyectar las soluciones problemas por triplicado.

3. Realización de la validación y evaluación de los resultados analíticos

Linealidad

Se realizan mínimo cinco puntos para un intervalo de confianza del 95%.
El ensayo de linealidad se efectúa sobre soluciones patrón del analito comprendidas en el rangode 40% a 160% del valor teórico.(aprox. 0.1mg/ml)
Cada muestra se inyecta por triplicado.
Se prepara la solución stock del patrón pesando 19.89 mg de Domperidona y disolviendo a 100.0 ml con DMF y luego diluyendo según el siguiente cuadro con fase móvil.

%
Dilución de sol. stock
Áreas
Concentración (mg/ml)
Área promedio
40
2/10
2174143
2122858
2111771
0.0398
2136257
80
4/10
4559682
46875574714566
0.0796
4653935
100
5/10
6230638
6161197
6254710
0.0994
6215515
120
6/10
7222671
7296707
7397361
0.1194
7305580
160
8/10
9711600
9781877
9838664
0.1591
9777380
Cuadro 1 _ Linealidad


Estadísticas de la regresión
Coeficiente de correlación múltiple
0.99871513
Coeficiente de determinación R^2
0.99743191
R^2 ajustado
0.9972179
Error típico
0.00206426
Observaciones
14
Figura 2: Estadísticas de laregresión, resumen


 
Grados de libertad
Suma de cuadrados
Promedio de los cuadrados
F
Valor crítico de F
Regresión
1
0.01986013
0.01986013
4660.73189
6.4782E-17
Residuos
12
5.1134E-05
4.26116E-06


Total
13
0.01991126
 
 
 
Figura 3: Análisis de la varianza

El modelo lineal es altamente significativo

Observación
Pronóstico 0.0398
Residuos
Residuos estándares
1
0.03902753
0.000772470.389494631
2
0.0388555
0.0009445
0.476234563
3
0.076838
0.002762
1.392646592
4
0.07882214
0.00077786
0.392207445
5
0.07924122
0.00035878
0.180900615
6
0.10276504
-0.00336504
-1.696709214
7
0.10168757
-0.00228757
-1.153432618
8
0.10313855
-0.00373855
-1.885038217
9
0.11815772
0.00124228
0.626380608
10
0.11930648
9.3521E-05
0.047154702
11
0.12086826
-0.00146826
-0.740319018
12
0.15677667
0.00232333...