Variado

C

Tiempo de Trombina
Para la determinación del tiempo de trombina do más arriba. Tapar, dejar reposar 30 minutos y luego mezclar suavemente (sin agitar) hasta obtener disolución completa antes de su uso. Fechar. Se recomienda mantener el Reactivo A en el frasco original luego de su reconstitución y durante su uso. PRECAUCIONES El Reactivo A es para uso diagnóstico "in vitro". Utilizar losreactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de química clínica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivo Provisto: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Reactivo A reconstituido: estable 7 días en refrigerador(210oC). Para una conservación más prolongada puede ser conservada a -20oC durante 30 días en su frasco original o en alícuotas fraccionadas en Eppendorf o tubos de plástico. Para descongelarla, hacerlo rápidamente a 37oC. No volver a congelar. Evite calentamientos prolongados. Para optimizar la estabilidad del reactivo se recomienda, una vez finalizado su uso, tapar el reactivo y conservarlorefrigerado (2-10oC) en su vial original. MUESTRA Plasma a) Recolección: obtener sangre cuidadosamente, evitando estasis o espuma y colocarla en un tubo con anticoagulante en proporción 9+1 exacta (ejemplo: 4,5 ml de sangre + 0,5 ml de anticoagulante). Mezclar suavemente. Centrifugar y separar el plasma antes de los 30 minutos. La extracción se debe efectuar con jeringas plásticas. b) Aditivos: para obtenerel plasma debe emplearse Anticoagulante TP de Wiener lab. o citrato de sodio 3,8% o 3,2%. No debe emplearse EDTA o heparina. c) Sustancias interferentes conocidas: el reactivo utilizado en forma manual, no presenta interferencias por: bilirrubina hasta 20 mg/dl, triglicéridos hasta 2000 mg/dl ni hemoglobina hasta 250 mg/dl. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en elpresente método. MATERIAL REQUERIDO (no provisto) - Tubos de hemólisis. - Micropipetas capaces de medir los volúmenes indicados.
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SIGNIFICACION CLINICA El tiempo de trombina es parte de las pruebas de screening coagulométricas que se emplean en la localización de la causa de un desorden hemostático. Al producirse un trauma o injuria vascular, la trombina formadaescinde al fibrinógeno soluble en monómeros de fibrina que polimerizan espontáneamente y luego son estabilizados dando lugar a la malla insoluble de fibrina. El tiempo de trombina evalúa esta última etapa de la coagulación, es decir, la conversión del fibrinógeno a fibrina. Por lo tanto, la anomalía en el nivel funcional del fibrinógeno, la presencia de sustancias que interfieran en la acción de latrombina sobre el fibrinógeno (heparina, hirudina) o las que bloquean la polimerización de los monómeros de fibrina (PDF/pdf, paraproteínas) conducen a un prolongamiento del test Tiempo de Trombina. Esta determinación no detecta deficiencias del factor XIII. Entonces, la alteración del test de Tiempo de Trombina puede deberse a: desórdenes cualitativos o cuantitativos del fibrinógeno, actividadfibrinolítica aumentada, terapias con anticoagulante, terapias fibrinolíticas, etc. FUNDAMENTO DEL METODO Este ensayo se basa en la medida del tiempo que tarda en coagular un plasma descalcificado, colocado a 37oC y en presencia de una solución de trombina de actividad fija. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: viales conteniendo trombina bovina liofilizada (aproximadamente 8.0 Unidades NIH/vial) conbuffer y estabilizantes. REACTIVOS NO PROVISTOS Agua bidestilada o desionizada. INSTRUCCIONES PARA SU USO Cada vial de Reactivo A puede ser reconstituido de dos formas diferentes, según sea la utilidad analítica requerida: Volumen de reconstitución 2 ml 3 ml Unidades de Trombina 4.0 UNIH/ml 2.7 UNIH/ml

Reconstitución: quitar el precinto metálico y abrir el vial, retirando lentamente el tapón de...