Variedad

Rev. Salud Anim. Vol. 29 No. 1 (2007): 8-20

Artículo reseña

¿CÓMO SUPERAR LA MEMBRANA CELULAR?
Marlén González* y A. Vega**
Grupos de Biología Molecular* y Virología**. Dirección Microbiología. Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA), Apartado 10, San José de las Lajas, La Habana, Cuba. Correo electrónico: marlen@censa.edu.cu RESUMEN: Con el propósito de poder introducir moléculasen el interior de la célula, superando su barrera natural, se han desarrollado diferentes procedimientos de gran utilidad en los estudios de biología molecular y celular, entre los que podemos citar: Técnicas de permeabilización celular, Técnicas de Microinyección, Técnicas Transfección celular y Técnicas de Transducción. La elección de uno u otro método depende en gran medida del objetivo finaldel experimento y de la disponibilidad de equipamiento adecuado. En esta revisión se abordan los métodos de laboratorio empleados para la introducción de moléculas en el interior de las células y se discuten las ventajas y desventajas de los mismos.
(Palabras clave: permeabilización celular; microinyección; transfección celular; transducción)

HOW TO CROSS THE CELLULAR MEMBRANE?
ABSTRACT: Inorder to introduce molecules into cells, different useful procedures have been developed in molecular and cellular biology studies. Among them we have: permeabilization, microinjection, cellular transfection, and transduction methods. The selection of the best method depends on the experiment final purpose and the equipment available. In this review we approach the laboratory methods used tointroduce molecules into cells with a special emphasis in their advantages and disadvantages.
(Key words: permeabilization; microinjection; cellular transfection; transduction)

INTRODUCCIÓN
En las últimas décadas se ha producido el desarrollo de una de las ramas más fascinantes de la biología: la tecnología del ADN recombinante, lo que ha permitido la manipulación del genoma, aumentando lasexpectativas en campos como la investigación, el diagnóstico y la terapéutica, lo que hace posible la transferencia genética (61; 62). En muchas ocasiones, el desarrollo de estos procedimientos es necesario para la introducción de moléculas en el interior de las células, ya sea con el fin de estudiar el efecto que produce dicha molécula sobre la célula, o bien con el fin de la síntesis de otra (2). Eneste último caso, la célula es empleada como factoría de síntesis de moléculas, lo que ha requerido la optimización de los métodos de transferencia para

poder aplicarlos con alta eficiencia y seguridad, así como con la menor dosis de invasividad posible (73). Con el propósito de introducir moléculas en el interior de la célula, se han desarrollado diferentes procedimientos que permitan superar subarrera natural, la elección del método está en función del objetivo final del experimento y de la disponibilidad de equipamiento adecuado. En esta revisión se abordan los métodos de laboratorio empleados para la introducción de moléculas en el interior de las células, así como se discute las ventajas y desventajas de los mismos. Métodos de transferencia de material genético al interior de lascélulas La posibilidad de introducir ácido nucleico en el interior de las células ha permitido el desarrollo del

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conocimiento de la regulación génica y la función de las proteínas en células eucariotas, tejidos y organismos. Los primeros estudios realizados por Pagano y Vaheri (53), Graham y Van Der Eb (31), con las técnicas de transfección mediadas por DEAE dextrano y fosfato de calcio,abrieron el camino a los siguientes experimentos donde se necesitaba transferir ADN dentro de células. Las células vivas presentan una barrera a la libre difusión de moléculas, la membrana plasmática, la cual evita la pérdida de componentes fundamentales e impide la entrada de moléculas externas, por ello posibilita la existencia de gradientes de concentración de productos a través de la membrana....