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Practica 4: Cromatografía
Objetivo: emplear a la cromatografía, como un método para separar los compuestos presentes en una mezcla; así mismo, utilizar a ésta para la purificación y posibleidentificación de los mismos.
Investigación previa:
Mecanismos cromatográficos: La cromatografía puede definirse como la técnica de separación de una mezcla de solutos, basándose esta separación en ladiferente velocidad con que se mueve cada uno de los solutos a través de un medio poroso, arrastrados por un disolvente en movimiento.
Cromatografía de papel es una de las técnicas cromatográficas mássimples y de las más antiguas. Como su nombre indica, la separación se realiza sobre tiras u hojas de papel filtro. Según las necesidades, se pueden adquirir varios tipos de papel cromatográfico, enlos que varían el espesor y la velocidad de flujo.
Una vez elegidos el tamaño y la calidad de papel que se va a utilizar se dibuja con un lapicero una línea paralela al lado por el que va a comenzarla cromatografía. Se marca un numero de pequeñas cruces sobre la línea de papel (a distancias iguales), correspondientes a cada una de las muestras que se han aplicado sobre el papel, y se señala cadamuestra para poderla identificar. Una vez hecho esto se coloca el papel con la línea base sobre una varilla, colgando ligeramente. Las muestras se aplican sobre el papel mediante un tubo capilar.Fases móviles y estacionarias: Las sustancias que son escasamente solubles en agua no se pueden separar por los métodos cromatográficos ordinarios de cromatografía sobre el papel, ya que la sustanciaavanzaría con el frente del disolvente. Sin embargo, la técnica puede extenderse a compuestos de este tipo, secando el papel e impregnándolo con aceite de oliva, silicona, parafina o goma látex. Elpapel impregnado adsorbe el compuesto orgánico del disolvente, y por el reparto entre éste y el disolvente se lleva a cabo la separación. Cuando el material se impregna el papel actúa como fase...